本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附法,酶标板微孔包被纯化的大鼠GAL特异性抗体,加入标准品和待测大鼠神经、血清样本,样本中的GAL抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除游离成分,加入HRP标记的GAL检测抗体,形成稳定免疫复合物,洗涤后进行酶促显色反应,终止后测定吸光度,依据标准曲线计算样本中GAL的浓度。
基本参数:

产品名称:大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA试剂盒
英文名称:GAL ELISA Kit
货号:Y-E1116
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度0.1pg/mL,超灵敏检测,适配神经肽微量检测需求
检测范围:0.2pg/mL~50pg/mL,覆盖大鼠神经、内分泌组织GAL表达浓度
反应时间:总实验时长120分钟,孵育90分钟,显色30分钟
保存条件:2~8℃避光冷藏,肽类标准品单独低温密封保存
有效期:未开封有效期6个月,开封后20天内用完
显色系统:超灵敏TMB显色体系,适配微量神经肽检测
检测波长:450nm检测,630nm背景校正
标准曲线绘制:7梯度低浓度标准稀释,四参数拟合,R²≥0.992
特异性:特异性结合大鼠甘丙肽,与其他神经肽无交叉反应
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%
注意事项:神经样本采集后立即速冻保存,防止肽类降解;全程避光低温操作;洗涤充分,去除非特异性结合杂质;标准品现配现用。
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温回温 31min,浓缩洗涤液 1:24 稀释,大鼠下丘脑匀浆避光冰浴,防止多肽降解。
酶标板每孔添加 100μL GAL 梯度标准多肽、下丘脑上清、空白缓冲液。
酶标记抗 GAL 抗体 100μL / 孔,密封 37℃孵育 72min。
洗涤浸泡 36s,洗涤 5 次,垂直拍干微孔残留液体。
避光 TMB 显色液 100μL,37℃避光显色 18min。
滴加终止液充分混匀微孔。
读取 OD450 数值,定量甘丙肽 GAL 多肽浓度。
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