本试剂盒采用竞争法ELISA检测原理,适配大鼠小分子多肽SS的定量检测。酶标板预先包被SS抗原,检测时样本中的内源性生长抑素与固相包被SS抗原竞争结合限量的酶标记特异性抗体。样本中SS含量越高,结合固相的酶标抗体越少,显色吸光度值越低。通过标准曲线拟合浓度与吸光度的对应关系,精准测定大鼠样本中SS的含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠生长抑素(SS)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1382 |
英文名称 | SS ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度0.2pg/mL,微量生长抑素可精准定量。
检测范围:0.6pg/mL - 85pg/mL,适用于大鼠血清、胰腺、下丘脑组织样本。
反应时间:全程90分钟,37℃样本温育35分钟、二抗温育30分钟、显色25分钟。
保存条件:2-8℃冷藏避光,所有试剂组分密封保存,防止吸湿失效。
有效期:未开封有效期12个月,开盖后2周内用完。
特异性:特异性结合大鼠SS,与生长激素、胰岛素无交叉反应。
重复性:板内CV≤6.8%,板间CV≤8.8%,内分泌调节因子检测误差小。
注意事项:胰腺样本需低温处理,避免激素降解;杜绝样本反复冻融。
实验前准备工作:
1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分(酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液)从 2~8℃取出,室温(20~25℃)放置平衡 30min,严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制:按标签标注比例用去离子纯水稀释(常见 20× 浓缩液:1 份浓缩液 + 19 份纯水),混匀备用,现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释:
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解,室温静置 10min,轻柔吹打混匀;
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品,单独标记,剩余原液分装 - 20℃避光保存,避免反复冻融。
待测样本预处理:血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释,浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清;溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备:恒温 37℃孵育箱、酶标仪(450nm 主波长,630nm 参比)、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机(或手动洗板槽)、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染,移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条,剩余未使用板条装入铝箔密封袋,加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记:空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔(所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差)。
公司正在出售的产品:
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实验操作流程:
试剂盒室温放置 29min,稀释洗涤液,梯度稀释 SS 生长抑素标准品,拆分酶标板条并编号,大鼠血浆样本低温稀释处理。
标准孔加入 SS 标准稀释液 50μL,样本孔加入稀释血浆样本 50μL,空白孔补稀释液 50μL,全部孔加入酶标记抗体工作液 100μL,封板密封。
37℃避光孵育 59min,竞争结合固相抗体位点。
弃净孔内液体,洗涤液浸泡每孔 40s,甩干洗板 5 次,洗除非特异性吸附杂质。
每孔加注显色 A、B 液各 50μL,混匀后 37℃避光显色 16min。
加入终止液 50μL 终止显色反应,轻晃酶标板混匀。
酶标仪 450nm 读取吸光度,换算样本 SS 浓度。
关键字: 大鼠生长抑素;SS;ELISA试剂盒;
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