本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，微孔板固相固定有小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白（KLH）特异性抗体。检测时，样本、标准品中的KLH抗原与固相捕获抗体特异性结合，洗去游离杂质后，加入HRP标记的KLH检测抗体，形成完整的固相抗体-抗原-酶标抗体免疫复合物。充分洗涤后加入TMB底物启动显色反应，显色强度与样本中KLH蛋白含量正相关，终止反应后测定吸光度，依据标准曲线即可精准计算样本中目标蛋白的含量。
基本参数：
产品名称：小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)ELISA试剂盒
英文名称：KLH ELISA Kit
货号：Y-E2050
规格：48T/96T
灵敏度：最低检出 0.17ng/mL
检测范围：0.35ng/mL～19ng/mL
反应时间：室温孵育 90min，酶标记物 54min，显色 20min，终止后立即检测，合计 164min
保存条件：试剂盒 2～8℃避光；KLH 标准品 - 20℃冻存，避免蛋白变性
显色系统：双组份 TMB 临用混合显色
检测波长：450nm+620nm
标准曲线绘制：七组倍比稀释标准品，半对数拟合标准曲线
注意事项：免疫后小鼠血清避免高温灭活；洗板次数不少于 6 次降低背景值。
关键注意事项：
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）
避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果
显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 30min，稀释洗涤工作液，梯度稀释 KLH 标准抗原溶液。
酶标板依次加样标准品、免疫后小鼠血清样本、阴性对照孔。
直接添加酶标记二抗，封板 37℃孵育 57min。
洗板 4 次，浸泡 31s / 次，拍干微孔残液。
遮光显色底物反应 15min。
加入终止液终止反应，混匀体系。
酶标仪读数，计算抗 KLH 抗体含量。
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