BF555标记的Ki67抗体
原理特点
本抗体以BF555橙红色荧光标记,特异性识别增殖细胞核抗原Ki67,Ki67仅表达于增殖期细胞,静止期细胞不表达,是评估细胞增殖活性、肿瘤增殖指数的金标准标志物。该抗体特异性强、染色均匀,可精准标记肿瘤细胞、干细胞等增殖细胞,BF555荧光抗淬灭性好,适合组织切片免疫组化荧光染色、细胞增殖定量分析、肿瘤恶性程度评估及细胞周期相关研究。
英文名称:Ki-67 Rabbit pAb, BF555 conjugated
中文名称:BF555标记的Ki67抗体
英文别名:Antigen identified by monoclonal antibody Ki 67; Antigen KI67; KIA; Ki67; MKI67; Proliferation related Ki 67 antigen; Antigen KI-67; KI67_HUMAN.
靶标:Ki-67(MKI67),增殖细胞核标志物,仅表达于分裂期细胞,G0 静息期阴性
荧光标记:BF555;Ex=555 nm,Em=572 nm
抗体类型:兔多克隆 / 兔重组单克隆
种属反应:人、小鼠、大鼠、猴
适用实验:组织 IHC 增殖染色、IF、流式增殖分型、ICC
功能用途:肿瘤增殖指数评估、干细胞增殖、细胞周期、药效增殖抑制检测
储存:-20℃避光分装
靶点背景
1. Ki67 为增殖细胞核内蛋白,仅在细胞分裂周期(G1/S/G2/M)表达,G0 静息期阴性
2. 定量反映细胞增殖活跃程度,增殖指数是病理评估关键参数
3. 肿瘤恶性程度分级、组织增殖活性、药物抗增殖效果评价金标准标志物
实验操作过程注意事项
抗体稀释
使用专用抗体稀释液或含BSA的缓冲液稀释抗体,避免用纯水稀释(纯水中无盐分会导致抗体变性);
严格按照说明书的建议稀释比例进行稀释,若说明书未提供,可通过预实验确定最佳稀释比例(通常1:500-1:10000);
稀释后的抗体需一次性用完,未用完的部分不可再次冻存。
抗体孵育
一抗孵育:通常4℃孵育过夜,可减少非特异性结合,避免室温孵育时间过长导致抗体变性;
二抗孵育:室温孵育1-2小时,孵育期间需避光(荧光二抗);
孵育时需保证抗体均匀覆盖样本表面,避免产生气泡;
实验过程中使用封闭液(如5%BSA或脱脂牛奶)封闭非特异性结合位点,减少背景信号。
洗涤步骤
每步孵育后,需用PBST或TBST洗涤3-5次,每次5分钟,彻底去除未结合的抗体;
洗涤时需轻轻晃动培养板或载玻片,避免用力过猛导致样本脱落;
洗涤液需新鲜配制,避免使用过期或变质的洗涤液。
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