本试剂盒基于双抗体夹心ELISA原理，微孔板预先包被人巨噬细胞刺激蛋白特异性捕获抗体，待测样本中的MSP抗原可与固相抗体特异性结合；孵育洗涤后加入酶标记MSP检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体的免疫夹心结构；洗去游离反应物后进行显色反应，显色强度与样本中巨噬细胞刺激蛋白含量呈正相关，通过吸光度检测和标准曲线换算，实现靶蛋白的定量检测。
基本参数：
产品名称：人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)ELISA试剂盒
英文名称：MSP ELISA Kit
货号：Y-E3519
规格：48T/96T
灵敏度：检出下限 2.1ng/L
检测范围：4.2~269ng/L
反应时间：一抗结合 98min，酶二抗 58min，避光显色 19min
保存条件：2~8℃冷藏，未开封试剂盒有效期 6 个月
显色系统：双组分 TMB 显色套装，临用配制
检测波长：450nm，620nm 参比波长
标准曲线绘制：四参数非线性拟合标准曲线，用于精确定量 MSP 含量
注意事项：细胞上清去除巨噬细胞沉淀；微孔板不可风干；剩余试剂禁止倒回原装瓶
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温放置 33min，取用酶标板，划分标准品孔、待测样本孔、空白孔，每孔添加预处理稀释液 100μL，空白孔加稀释液。
直接向全部孔位加入酶标记二抗液 55μL，摇匀后封板膜密封。
37℃恒温孵育 71min，全程避光操作。
撕除封板膜，弃液后洗板液加满每孔静置 30s，拍干，重复洗板 6 次。
每孔加入显色 A 液、B 液各 50μL，避光 37℃显色 19min。
每孔添加终止液 50μL，轻晃酶标板混匀终止反应。
450nm 波长测定吸光度，空白归零，根据标准曲线得到 MSP 蛋白含量。
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