DpnI
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DpnI

价格 240 1016
包装 500U 2500U
最小起订量 500U
发货地 上海
更新日期 2024-03-29

产品详情

英文名称:DpnI保存条件: -20℃保存。
纯度规格: 99.99%产品类别: 分子生物试剂 核酸相关
2024-03-29 DpnI DpnI 500U/240RMB;2500U/1016RMB 240 -20℃保存。 99.99% 分子生物试剂 核酸相关

DpnI

DpnI内切酶为信裕生物最新研发产品,基本信息如下:

甲基化干扰?

识别序列
缓冲液兼容性(%)
酶切温度
失活条件
GA* ^TC
CT ^A*G
1X B
1X G
1X O
1X R
1X Y
2X Y
37℃
80℃ 
20min
甲基化的序列
才可被酶切
100
100
50-100
50-100
100
50-100

*,该位点甲基化后才可以被DpnI所识别并酶切。
DpnI识别并酶切DNA双链中腺嘌呤N6位甲基化(N6-methyladenine)的GATC序列。DpnI识别位点中两个腺嘌呤的N6位都甲基化时,呈现正常的酶活力;只有一个腺嘌呤的N6位甲基化时,酶切活力会降低约60倍。
从dam+(Dam甲基化酶表达阳性)大肠杆菌菌株如DH5α等提取的质粒的GATC序列中腺嘌呤N6位被甲基化,从而可以被DpnI识别和酶切;而从dam-(Dam甲基化酶表达阴性)大肠杆菌菌株如JM110等提取的质粒的GATC序列中腺嘌呤N6位没有被甲基化,从而不能被DpnI识别和酶切(参考图1)。

图1.DpnI酶活性检测结果图。A.分别用从JM110菌株(dam-)和DH5α菌株(dam+)中提取的质粒400ng,在20μl酶切体系中,分别加入或不加入10U的DpnI,37℃酶切1小时,然后电泳分析。图中可见从DH5α中提取得到的甲基化质粒可以被DpnI完全消化,而对于从JM110中提取得到的非甲基化质粒没有任何非特异性的酶切作用。B.取图A中各酶切产物5μl分别转化DH5α感受态细胞然后涂板,培养过夜。图中可见从DH5α中提取得到的甲基化质粒被DpnI消化1小时后,不会产生任何克隆,进一步验证了DpnI在1小时内可以完全消化甲基化的质粒,并确保本产品可以用于质粒点突变。

酶储存液组成为:10mM Tris-HCl (pH7.4 at 25℃),300mM NaCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5mg/ml BSA and 50% glycerol。
1X Buffer Y组成为:33mM Tris-acetate (pH7.9 at 37℃),10mM magnesium acetate,66mM potassium acetate,0.1mg/ml BSA。
酶切和连接效率:50倍过量的本内切酶消化1小时,>70%被酶切的pBR322 DNA片段可以重新连接,这些片段>95%可以被重新酶切(recut)。
活性单位定义:在37℃,50微升反应体系中反应1小时,将1微克的λDNA完全分解的酶量定义为1个活性单位,即1U。
包装清单:

产品编号
产品名称
包装
XY-6257-1
DpnI(10U/μl)
500U
XY-6010Y
10X Buffer Y
1ml
说明书
1份

 

保存条件:
-20℃保存。
注意事项: 
内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
如果发现预期的酶切位点不能切开,请确认特定位点是否已经被甲基化。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
 

使用说明:
1. 单酶切时可以参考如下反应体系进行:

待酶切DNA
不超过1μg
双蒸水或Milli-Q水
适量
10X Buffer Y
2μl
DpnI
0.5-1μl
总体积
20μl
37℃孵育1小时或更长时间

说明:请注意把Buffer和水等充分混匀后再加入内切酶,加入内切酶后可以用枪吹打或轻轻Vortex混匀。通常参考上述条件孵育1小时已经足够,但多孵育数小时甚至孵育过夜也不会产生负面影响。如果酶切较长时间甚至酶切过夜,可以使用更少量的酶。待酶切DNA量较大时,可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系。
2. 双酶切或多酶切时,需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液,然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行纯化,纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。

关键字: DpnI说明书;DpnI厂家

公司简介

上海康朗生物科技有限公司是一家集研发、生产、销售、服务于一体的一家生物科技企业,专营生化试剂、标准品、基因、蛋白、抗体、Elisa试剂盒、细胞生物学,分子生物学等高生物产品。总部位于上海,并在北京、广东,江西,吉林等全国30多个省市设有分公司和代理机构。涉及的产品被中国科学院、清华、北大、复旦,上海交大,复旦医学院,上海中医药大学,华东师范大学,第二军医大学,曙光医院,浦东新区人民医院等知名科研院所广泛使用,可靠而稳定的质量和完善的售后服务确。
成立日期 2015-05-29 (9年) 注册资本 100万元整
员工人数 50-100人 年营业额 ¥ 100万以内
主营行业 中间体,化学试剂,医药原料 经营模式 工厂
  • 上海康朗生物科技有限公司
VIP 5年
  • 公司成立:9年
  • 注册资本:100万元整
  • 企业类型:厂家
  • 主营产品:主营产品:ELISA试剂盒、重组蛋白、抗体、生化试剂、标准品、分子生物学试剂、细胞生物学等科研用品
  • 公司地址:松江区新桥镇卖新公路2077号3089室
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