茶黄素-3-没食子酸酯

茶黄素-3-没食子酸酯是红茶中茶黄素类的一种主要单体，也是红茶茶汤的色泽及风味的主要指标之一。现有文献表明，茶黄素具有多种药理与保健功能，如降血脂、抗氧化、抗衰老等，某些功能方面甚至优于儿茶素；近年来，茶黄素-3-没食子酸酯的医药保健功能逐渐受到了极大的关注，但是茶黄素的提纯难度较大，尤其是茶黄素-3-没食子酸酯单体成分的分离纯化文献报道更是少之又少。多酚氧化酶(PPO)又称儿茶酚氧化酶，它广泛存在于植物(如荔枝)组织中，具有较强的催化儿茶素合成茶黄素的能力。现有文献表明，茶黄素具有多种药理与保健功能，如降血脂、抗氧化、抗衰老等，某些功能方面甚至优于儿茶素；近年来，茶黄素-3-没食子酸酯的医药保健功能逐渐受到了极大的关注。一种茶黄素-3-没食子酸酯的制备方法，以新鲜荔枝皮为活性多酚氧化酶来源，以表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和表儿茶素(EC)为原料制备茶黄素-3-没食子酸酯，再经过大孔吸附树脂柱层析技术进行纯化，分离，制备出高纯度茶黄素-3-没食子酸酯；该制备方法首次以荔枝皮中的PPO作为催化剂，催化合成茶黄素-3-没食子酸酯，并进行分离纯化获得纯度较高的茶黄素-3-没食子酸酯，解决了荔枝皮中PPO在茶黄素-3-没食子酸酯合成中的催化应用，且该方法高效，重复性好，稳定性高。具体包括以下步骤：
S1)荔枝多酚氧化酶的提取：称取新鲜荔枝皮，加入缓冲液，捣碎后过滤，保留滤液；向滤渣中加入缓冲液，搅拌，过滤，保留滤液；合并两次滤液，然后离心，取上清液即得荔枝多酚氧化酶液；
S2)茶黄素-3-没食子酸酯粗品溶液的制备：称取表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与表儿茶素(EC)，加入缓冲液溶解充分，然后加入步骤S1)所述荔枝多酚氧化酶液以及过氧化氢溶液，搅拌反应，过滤，保留滤液，即为茶黄素-3-没食子酸酯粗品溶液；
S3)茶黄素-3-没食子酸酯粗品的纯化：将步骤2)得到的所述茶黄素-3-没食子酸酯粗品溶液作为柱层析上样液逐渐加入已经装有大孔吸附树脂的层析柱内，上样结束后先用水溶液洗脱，然后再用醇溶液洗脱，并收集醇溶液洗脱液，将收集的所述醇溶液洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥即得到茶黄素-3-没食子酸酯。