9002-07-7
中文名称
胰蛋白酶
英文名称
Trypsin
CAS
9002-07-7
分子式
C6H15O12P3
分子量
372.1
MOL 文件
9002-07-7.mol
更新日期
2025/10/09 22:41:50

基本信息
中文别名
胰蛋白酶胰液酵素
胰淀粉酶
蛋白酶类
结晶胰蛋白酶
重组胰蛋白酶
胰蛋白酶(猪胰脏)
胰蛋白酶1:250
胰酶-EDTA溶液
胰蛋白酶(+4℃)
英文别名
500mgu-4858
C00298
TRYPSIN
trypure
tryptar
Tryprar
ec3.4.4.4
parenzyme
cocoonase
所属类别
生物化工:酶及辅酶类 所属类别一
生物化学品: 生化试剂: 酶 所属类别二
生物化学品: 酶类: 治疗用酶 所属类别三
食品添加剂: 酶和微生物制剂: 酶制剂物理化学性质
外观性状白色结晶状物质或冻干粉,溶于水,不溶于有机溶剂,pI10.5,最适pH值7.5-8.5。稳定性:pH值为2-3时最稳定。抑制剂有二异丙基氟磷酸(DFP)、苯甲基磺酰氟(PMSF)、对甲苯磺酰赖氨酸氯甲基酮(TLCK)、天然的胰蛋白酶抑制剂、丝蛋白酶抑制剂、巨球蛋白:α2、Ag+。激活剂为Ca2+,能阻滞胰蛋白酶的自溶,促进胰蛋白酶原的激活。底物专一性是带正电荷的赖氨酸与精氨酸的侧链,产物是羧端为赖氨酸或精氨酸的肽,酶反应优先水解精氨酸、赖氨酸。
熔点115°C
堆积密度200kg/m3
密度1.37[at 20℃]
蒸气压0Pa at 25℃
储存条件−20°C
溶解度在水性缓冲液可重塑
酸度系数(pKa)pK1:6.25 (25°C,μ=0.1)
形态lyophilized powder
颜色白色粉末
PH值7.70-8.30
气味 (Odor)Odorless
生物来源Porcine pancreas
水溶解性Soluble in water (10 mg/ml), phosphate buffers (10 mg/ml), and balanced salt solutions (1 mg/ml).
Merck13,9865
Specific Activity90-110% (compared to standard)
稳定性稳定的。与强氧化剂不相容。
LogP-1.3 at 20℃
CAS 数据库9002-07-7
EPA化学物质信息Trypsin(9002-07-7)
应用领域
参考质量标准二
酶活力 4000苯甲酰精氨酸乙酯(BAEE) U/mg; 1500 BAEEU/mg (单位定义:25℃,pH=8.0条件下每分钟使254nm处吸光度增加0.001的酶量为1U),并检测干燥失重、灼烧残渣等项均合格。参考质量标准三
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指标名称
指标
指标名称
指标
效价/(单位/mg)
≥2500/糜蛋白酶/(单位/2500)
<50
酸碱度(Ph值)(2mg/ml)
5.0~7.0/单位胰蛋白酶
溶液的澄清度/澄清/干燥失重/%
≤5.0
[10mg
ml(0.9%NaCl)]
注射液中国药典2000年版735页
指标名称
指标
指标名称
指标
效价
为标示量的85.0%~120.0%
无菌、符合规定
酸度(pH值)
5.0~7.0
其他、符合注射有关规定
干燥失重
≤8.0%
参考质量标准一
见160酶制剂。常见问题列表
简介
胰蛋白酶为蛋白酶的一种,EC3.4.21.4。在脊椎动物中,作为消化酶而起特点。在胰脏是作为酶的前体胰蛋白酶原而被合成的。作为胰液的成分而分泌,受肠激酶,或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶,是肽链内切酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的特点,而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体,起活化特点。是特异性最强的蛋白酶,在决定蛋白质的氨基酸排列中,它成为不可缺少的工具。
生理作用
胰蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶类,能特异性地作用于肽链Lys或Arg残基的羧基端。在生理上参与了动物体内的新陈代谢、消化、凝血等功能的重要过程。在细胞生物学领域,胰蛋白酶能使细胞膜与培养皿结合处蛋白降解,使得两者分离。并且由于细胞自身内部细胞骨架的张力以及培养液表面张力的作用下成为球形,从而实现细胞的消化。毒性
ADI不作限制性规定(FAO/WHO,2001)。食品添加剂最大允许使用量最大允许残留量标准
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添加剂中文名称
允许使用该种添加剂的食品中文名称
添加剂功能
最大允许使用量(g/kg)
最大允许残留量(g/kg)
胰蛋白酶
食品
酶制剂
按生产需要适量使用(有特别规定的除外)
操作步骤
1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。 4. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。 5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。 6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 7. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 8. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 9. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。样本
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。用途
本试剂盒应采用双抗体夹心法测定血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中的含量。