9002-64-6
中文名称
甲状旁腺激素
英文名称
Parathyroid
CAS
9002-64-6
基本信息
中文别名
副甲状腺素甲状旁腺激素
英文别名
pthPTH1
paroidin
kakerbin
Paroidine
parathyrin
Parathyoid
Parathormon
PARATHYROID
parathormone
所属类别
原料药:其它常见问题列表
简介
人甲状旁腺激素(PTH)由84个氨基酸所组成的单链多肽,不含胱氨酸,分子量约9.500。甲状旁腺激素的主要作用是调节体内钙和磷的代谢。它一方面加强破骨细胞溶解骨质的活动,使骨组织中的磷酸钙分解释放入血,保持血钙的正常含量(9~11毫克%),另一方面抑制肾小管对磷的重吸收,使磷的排泄增多,而使血磷浓度降低;当血磷降低时,骨骼中的磷酸钙又释放入血以补充血磷,使血钙增高。
生理作用
甲状旁腺激素的生理作用如下:①增强破骨细胞活动,促进骨质吸收,动员骨钙进入血液,使血钙增高;
②抑制近球小管对磷的重吸收,使尿中磷酸盐增多,并促进远球小管和集合管对钙的重吸收,使尿钙降低;
③可激活肾内羟化酶,促进25-羟维生素D3转变为具有活性的1,25-二羟维生素D3,从而增进肠道对钙的吸收。血钙浓度又控制PTH的分泌,血钙降低时促进其分泌,增高时抑制其分泌,高血磷则通过血钙浓度降低而引起PTH分泌。
应用价值
甲状旁腺激素(PTH)主要用于诊断原发性甲状旁腺功能亢进症,此外在高血压、糖尿病、肾性骨病、妊高征等患者中也表现为增高。操作步骤
1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。 4. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。 5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。 6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 7. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 8. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 9. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。样本
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。用途
本试剂盒应采用双抗体夹心法测定血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中的含量。