B型流感病毒蛋白抗体的应用

2020/6/4 14:43:41

背景[1-3]

B型流感病毒蛋白抗体是一类可以特异性结合B型流感病毒蛋白的多克隆抗体,主要用于检测B型流感病毒蛋白的免疫组化、ELISA等实验。流行性感冒病毒(influenza virus),是正粘病毒科(Orthomyxoviridae)的代表种,简称流感病毒,包括人流感病毒和动物流感病毒,人流感病毒分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型,是流行性感冒(流感)的病原体。

病毒的核心包含了存贮病毒信息的遗传物质以及复制这些信息必须的酶。流感病毒的遗传物质是单股负链RNA,简写为ss-RNA,ss-RNA与核蛋白(NP)相结合,缠绕成核糖核蛋白体(RNP),以密度极高的形式存在。除了核糖核蛋白体,还有负责RNA转录的RNA多聚酶。

基质蛋白构成了病毒的外壳骨架,实际上骨架中除了基质蛋白(M1)之外还有膜蛋白(M2)。M2蛋白具有离子(主要是Na+)通道和调节膜内PH值的作用,但数量很少。基质蛋白与病毒最外层的包膜紧密结合起到保护病毒核心和维系病毒空间结构的作用。

血凝素(HA)呈柱状,能与人、鸟、猪豚鼠等动物红细胞表面的受体相结合引起凝血,故而被称作血凝素。

神经氨酸酶(NA)是一个呈蘑菇状的四聚体糖蛋白,具有水解唾液酸的活性,当成熟的流感病毒经出芽的方式脱离宿主细胞之后,病毒表面的血凝素会经由唾液酸受体与宿主细胞膜保持联系,需要由神经氨酸酶将唾液酸水解,切断病毒与宿主细胞的最后联系,使病毒能顺利从宿主细胞中释放,继而感染下一个宿主细胞。

应用[4][5]

用于犬Ⅲ型干扰素的功能特点及B型流感病毒NEP蛋白出核功能研究

验证犬IFN-λ1是否能诱导干扰素诱导基因的表达,用实时荧光定量PCR的方法检测了犬IFN-λ1刺激MDCK细胞后的ISG15,Mx1和2’5’-OAS表达水平,结果表明,该三种干扰素诱导基因均被显著上调。我们还用同样的方法检测了VSV和流感病毒感染后的MDCK细胞中的IFN-λ1的mRNA水平,结果显示,与对照相比,IFN-λ1的mRNA水平也明显被上调。

最后,还通过ELISA的方法进行了犬IFN-λ1与其受体胞外域(IFNλR1-EC)的结合检测,结果显示,犬IFN-λ1能很好的与IFNλR1-EC进行结合。流感病毒的核输出蛋白(NEP蛋白)是病毒粒子中的结构蛋白,由病毒的第八个基因片段编码产生,在病毒的基因组复制与转录,病毒vRNP复合物的细胞核输出过程、病毒粒子的组装、出芽等多个环节发挥着重要作用。目前对B型流感病毒NEP蛋白核穿梭机制的研究还存在很多尚未解决的问题。

以BNEP为研究对象,发现了B型流感病毒NEP蛋白上存在三个NES,且都是CRM1依赖的。这三个NES在体内可与CRMl直接结合。这三个NES上的疏水性氨基酸对其功能的发挥都是至关重要的,三个NES共同介导了蛋白的出核。

参考文献

[1]Cytokine and chemokine mRNA expression profiles in BALF cells isolated from pigs single infected or co-infected with swine influenza virus and Bordetella bronchiseptica[J].Andrzej Kowalczyk,Ma?gorzata Pomorska-Mól,Krzysztof Kwit,Zygmunt Pejsak,Jaros?aw Rachubik,Iwona Markowska-Daniel.Veterinary Microbiology.2014

[2]ISG15 Regulates Peritoneal Macrophages Functionality against Viral Infection[J].Emilio Yángüez,Alicia García-Culebras,Aldo Frau,Catalina Llompart,Klaus-Peter Knobeloch,Sylvia Gutierrez-Erlandsson,Adolfo García-Sastre,Mariano Esteban,Amelia Nieto,Susana Guerra.PLOS Pathogens.2013(10)

[3]Influenza-associated mortality in temperate and subtropical Chinese cities,2003-2008[J].Feng,Luzhao,Shay,David K,Jiang,Yong,Zhou,Hong,Chen,Xin,Zheng,Yingdong,Jiang,Lili,Zhang,Qingjun,Lin,Hong,Wang,Shaojie,Ying,Yanyan,Xu,Yanjun,Wang,Nanda,Feng,Zijian,Viboud,Cecile,Yang,Weizhong,Yu,Hongjie.EN.2012(4)

[4]Cloning,expression and antiviral activity of IFNγfrom the Australian fruit bat,Pteropus alecto[J].Vijaya Janardhana,Mary Tachedjian,Gary Crameri,Chris Cowled,Lin-Fa Wang,Michelle L.Baker.Developmental and Comparative Immunology.2011(3)

[5]范文辉.犬Ⅲ型干扰素的功能特点及B型流感病毒NEP蛋白出核功能研究[D].广西大学,2015.

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