亚叶酸的制备

背景及概述^[1-3]

亚叶酸（Leucovorin），化学名N-[4-[(2-氨基-5-甲酰基-1,4,5,6,7,8-六氢-4-氧代-6-蝶啶基)甲基]氨基]苯甲酰-L-谷氨酸，目前已被广泛应用于癌症的联合化疗。

亚叶酸通过叶酸盐的摄取吸收途径进入人体。一旦进入细胞它便迅速代谢为5-亚甲基四氢叶酸酯。5-亚甲基四氢叶酸酯是叶酸的活性形式，可以参与尿嘧啶转换为胸腺嘧啶的单碳转移反应。亚叶酸因此能够对抗叶酸拮抗剂引起的四氢叶酸酯形成受阻。

左旋亚叶酸作为抗肿瘤的解毒剂和抗巨幼细胞贫血的辅助用药，其剂量是亚叶酸的1/2，左旋亚叶酸不需要被二氢叶酸还原酶还原即可参加利用叶酸盐作为一碳单位来源的反应，且左旋亚叶酸可以主动或被动地通过细胞膜；左旋亚叶酸基本作用和叶酸相同，但效果优于叶酸，同时左旋亚叶酸也具有刺激白细胞生长成熟的作用，能改善巨幼细胞性贫血。

制备^[1][3-4]

报道一、低钙含量亚叶酸的制备方法

在50L玻璃反应釜中加入27L水，降温至10℃以下，往反应釜中同时滴加配制好的亚叶酸钙水溶液（900g溶于13.5L水）和1.2N盐酸，维持体系pH值2.7～2.9，温度6℃～10℃，3.5小时滴加完毕。离心过滤，用水（4L）淋洗，得到湿品。

在20L玻璃反应釜中加入9L去离子水，降温至6℃～10℃，加入上述湿品浆洗，离心过滤，用水（4L）淋洗，湿品流化床穿流干燥1小时后再40℃真空干燥24小时，得淡黄色粉末686g，含水量8.1%。原子吸收法测试钙含量为0.006%，灼烧残渣0.04%。

报道二、左亚叶酸的制备方法

一种利用吸附柱层析的方法从(6RS)-亚叶酸及其钙盐中分离出(6S)-亚叶酸及其钙盐的左亚叶酸及其钙盐的制备方法。它是选用中性或偏碱性吸附剂上柱构成吸附柱，将(6RS)-亚叶酸及其钙盐溶解后上柱，再用水、有机溶剂或PH6.0-11.0的缓冲溶液及其混合溶液作为洗脱剂进行冲洗，收集(6S)-亚叶酸及其钙盐含量大于80％时的溶液，调节PH7.0，加入乙醇析出得(6S)-亚叶酸及其钙盐，再用水重结晶1-3次得99％以上的(6S)亚叶酸及其钙盐。

报道三、左亚叶酸的制备方法

在1L反应瓶中，先加入0.45L的纯水，搅拌下加热到55-60℃，再加入15g(0.0245mol，水分16.4％)的左亚叶酸钙，保温在55-60℃下，搅拌至基本溶清，先降温到0-10℃，滴加碳酸钠水溶液(2.6g碳酸钠(0.0245mol)溶于45mL的纯水中)，保持温度0-10℃，滴毕，保温搅拌1小时，过滤出析出的固体，滤饼用20ml的纯水洗一次，滤液即为左亚叶酸钠溶液。滤液投入1L的反应瓶中，搅拌下降温到0-5℃，控制反应体系温度在0-5℃，均匀滴加1N的稀盐酸，当酸化终点pH在2.0-2.5时，停止滴加，先搅拌约30min，然后静置陈化30min，过滤，滤饼用75mL的纯水洗2次，湿品冻干得左亚叶酸9.1g，收率：78％(纯度99.5％，钙离子0.065％，氯化物小于0.5％)。

参考文献

[1][中国发明]CN201310289962.9一种高效制备低钙含量亚叶酸的方法

[2]药物的发现与发明史