磷酸盐缓冲液的配置方法和应用举例

2020/9/14 10:53:51

背景及概述[1]

磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline,简称PBS)的是常用的用于生物学研究的一个缓冲溶液。PBS可以为三种溶液的英文缩写,分别是磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)、磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline)及磷酸盐缓冲钠(phosphate buffered sodium),其配制方法不同,pH值不同,发挥的生物学作用亦不完全相同。如无特殊说明,生物学上常用的PBS是中性磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)。它是一种水基盐溶液中含有氯化钠,磷酸盐,以及(在某些配方)氯化钾和磷酸钾。缓冲液有助于保持恒定的pH值。解决方案的渗透压和离子浓度通常与人体pH相近(等渗)。主要用于一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节pH值,以便让实验的化学反应在条件下进行。部分用于食品或是饲料行业加工,如食品或者饲料真菌毒素检验中Elisa方法的洗板应用或者食品微生物检验中的稀释缓冲液。

配置方法[1]

磷酸盐缓冲液的配置方法,具体步骤为:

准备原料:将氯化钠:2份、蒸馏水10份、四水和磷酸钠0份;将上述成分混合后,加入稀硫酸,将其PH值调整至7.2;高压灭菌后,低温下保存;将溶液中加入四氧化三铁溶液,然后机械高速搅拌;弃上清;形成乳状物,再次冷置;室温下保存即可。

应用[2-3]

应用一、

CN201610520473.3公开了一种大豆分离蛋白基生物医用粘合剂及其制备方法。本方法首先将大豆分离蛋白溶于磷酸盐缓冲液中,然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺,搅拌反应30~60min后加入多巴胺,继续搅拌反应10~36h,最后透析、离心分离和冷冻干燥得到多巴胺改性的大豆分离蛋白;使用时首先将多巴胺改性的大豆分离蛋白溶于磷酸盐缓冲液中,然后加入交联剂、消炎抑菌剂,混合均匀后涂布于创面伤口处,滴加FeCl3溶液20~120s内伤口就能够牢固的粘合在一起。本发明制备的生物医用粘合剂具有快速响应和长效粘合的特点,能够在体内外湿润的环境中达到很好的粘合效果,生物相容性好,体内可完全生物降解,能够促进伤口快速愈合。

应用二、

CN201410328382.0公开了一种气道粘液模型的制备方法,该粘液模型的化学组分和物理性质与人气道粘液相匹配。所述模型的配方为:二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)+羟乙基纤维素(HEC)+血清蛋(BSA)+戊二醛(GA)+磷酸盐缓冲液(PBS)。制备方法为:(1)按照要求配置磷酸盐缓冲液;(2)将DPPC溶解在步骤(1)制备好的磷酸盐缓冲液中,磁力搅拌2小时;(3)将BSA、HEC加入到搅拌好的溶液中用垂直混合仪混合数天;(4)将GA加入步骤(3)制得溶液中在一定温度范围内进行交联反应,收集交联后的溶液进行冷冻干燥。本发明工艺简单,成本低廉,无毒害,该粘液模型生物、物理、化学性质与人气道粘液模型匹配,在粘液的保护机制、病理分析、药物输送、基因载体治疗方面至关重要。

参考文献

[1] [中国发明] CN201310559261.2 磷酸盐缓冲液

[2] CN201610520473.3一种大豆分离蛋白基生物医用粘合剂及其制备方法

[3] CN201410328382.0一种气道粘液模型的制备方法

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