芝麻素的制备方法和含量检测

2021/2/8 11:00:54

背景及概述[1]

芝麻素是一种含于芝麻籽中的天然成分,芝麻籽包含约0.3-0.5%的芝麻素。芝麻素具有优良的抗氧化作用,可抗衰老、调节血脂、保护肝脏、降低血压、抗癌、调节免疫力、使头发黑亮等诸多生理功效。在人体试验中,证明芝麻素可运送至肝脏,在肝中代谢成抗氧化物质,抗氧化效果比维生素E更强。

制备[1]

量取1L的芝麻油脚(965.8g),加入4L的无水乙醇,在30℃下搅拌5h,静置分层,取上层清液,旋转蒸发得到芝麻素富集物;向芝麻素富集物中加入无水甲醇,芝麻素富集物与无水甲醇的料液比为1∶4(kg/L),在55℃下浸取3h,得到浸取液;向浸取液中加入活性炭,活性炭的加入量为浸取液质量的1%,搅拌0.5h,然后过滤,得到芝麻素提取液;将芝麻素提取液缓慢降温至-10℃,使芝麻素结晶,结晶2h,过滤得到芝麻素粗品;向芝麻素粗品中加入石油醚,芝麻素粗品与石油醚的料液比为1∶1(kg/L),35℃下密闭混合0.5h,过滤得到芝麻素粗制品;将芝麻素粗制品溶于无水乙醇,芝麻素粗制品与无水乙醇的料液比为1:30(kg/L),在-5℃下结晶纯化,时间维持3小时,在此条件下经过2次结晶,真空干燥得到芝麻素产品2.16g,芝麻素的提取率为89.1%,所得芝麻素产品的纯度为92.1%。

含量测定[2]

一种测定芝麻种子内芝麻素含量的方法,包括下列步骤:

(1)配制芝麻素标准溶液:称取芝麻素标准品10mg,加入无水甲醇溶解并稀释至50mL,然后用0.45μm的过滤膜过滤,得到0.2mg/ mL的芝麻素标准溶液;

(2)绘制芝麻素标准曲线:取步骤(1)所得的芝麻素标准溶液20、10、5、4、2、0.8mL,分别加入无水甲醇0、10、15、16、18、19.2mL,摇匀配制成梯度浓度分别为200、100、50、40、20、8ug/mL的芝麻素标准品甲醇溶液,使用液相色谱仪分别对上述溶液进行色谱分析,根据测定结果绘制芝麻素标准曲线(芝麻素标准品溶液的液相色谱图参见图1),并得到芝麻素含量与峰面积的线性关系方程:A=587.525675x-4.531582,其中A为峰面积,x为芝麻素含量;

(3)配制待测样品溶液:使用豫芝11号芝麻种子为待测样品,将待测芝麻种子用万能粉碎机粉碎30s,然后用0.35μm的筛子过筛,取所得的芝麻粉样品0.2g,加入浓度为100%的乙醇5mL;

(4)超声处理和过滤:将步骤(3)所得的混合溶液在30~60℃的条件下进行超声波处理20~50min,然后用0.45μm的过滤膜对超声处理后的溶液进行过滤;

超声波处理的条件为:使用超声频率为40KHZ、型号为KQ3200DE的数控超声波清洗器,在70~100W的超声功率下进行超声处理。

(5)检测:取步骤(4)所得的滤液9μl,使用液相色谱仪对该滤液进行进样检测,根据芝麻素标准曲线、所得线性关系方程计算得出待测芝麻种子中芝麻素的含量。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201410052712.8 一种利用芝麻油脚提取芝麻素的方法

[2] [中国发明,中国发明授权] CN201510132312.2 测定芝麻种子内芝麻素含量的方法

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