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尿素-13C的丰度检测和应用

发布日期:2021/4/21 9:04:15

背景及概述[1]

尿素-13C呼气试验用来检查幽门螺杆菌的感染,其原理是将经过稳定核素[13C] 标记的底物引进机体(主要方式为口服),利用同位素比值质谱仪检测底物的最终代谢产物13CO2的变化来研究机体内代谢反应和生理过程,对13C尿素丰度的要求≥99%。

丰度检测[1]

尿素[13C]丰度的检测方法包括以下步骤:

S1.取尿素[13C]颗粒,研细,精密称取0.5g,置20ml量瓶中,加乙腈适量,超声9-15分 钟,放冷至室温,加乙腈稀释至刻度,摇匀,取溶液,以10000r/min离心9-15分钟,取上清液 作为供试品溶液。

S2.取供试品溶液1μl注入液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用仪,记录产生的色谱图和准分子离子(12C16ON2H5+、13C16ON2H5+、13C18ON2H5+,质量数分别为61.0402、62.0435、64.0478,分别标示为A、B、C)的离子信号响应强度,计算,即得,尿素[13C]丰度的计 算公式为:X=(B+C)/(A+ B+C) ×100%。

更为具体的,选用色谱条件:采用HILIC色谱柱(2.1*100mm,1.7μm),流动相A为乙腈,流动相B为1mmol/L的乙酸铵溶液,梯度洗脱(0-4min,95%A→50%A;4-4.5min,50%A→95%A;4.5-8min,95%A),流速为0.2-0.4ml/min,柱温33-36℃;质谱条件:电喷雾正离子化(ESI+)检测,扫描范围m/z60~121,毛细管电压3.0KV,锥孔电压8V,源温度96-101℃,脱溶剂气温度440-455℃,脱溶剂气流速740-805L/h。

应用[2]

CN201610984845.8公开了一种新型尿素-13C检测药剂,用于检测幽门螺杆菌,其包括以下组分重量配比:尿素[13C]72-78份,枸橼酸440-510份,枸橼酸钠180-230,矫味剂22-27份,甘露醇为4050-4210份,使用本发明检测时假阴性结果大大降低,口感更好,特别对儿童服用更为有利;工艺方面,采用分比例混合及特殊设备工艺方法,比常规方法制得的产品含量均匀性好,使用时溶解速度更快,进入体内后能更快速与幽门螺门杆菌发生反应。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201610984856.6 尿素[13C]丰度检测方法【公开】/尿素[13C]丰度检测方法【授权】

[2] CN201610984845.8一种新型尿素[13C]检测药剂

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