盐酸林可霉素通过作用于敏感细菌核糖体的50S亚基，阻止肽链的延长和抑制细菌蛋白质的合成，从而发挥抑菌及杀菌作用。
盐酸林可霉素是一种快效抑菌药，对那些正处于快速分裂、复制和繁殖的敏感菌，具有强大的抑制作用。
在兽医临床使用时，如若按照正常说明剂量使用，其可呈现良好的抑菌作用，而高浓度则呈现杀菌作用。
在兽医治疗临床上，盐酸林可霉素对革兰氏阳性菌、支原体和部分革兰氏阴性菌都具有良好的抗菌活性；但它的最有效抗菌谱还是肺炎链球菌、化脓性链球菌、葡萄球菌、支原体.....等革兰氏阳性菌及支原体，这是有效用药的基本前提！
并且，再由盐酸林可霉素的口服吸收和分布可以知道，口服后的盐酸林可霉素只有约30%～40%的药物进入体内，绝大部分药物都留在了消化道里。
那么，根据上述盐酸林可霉素的敏感抗菌谱，以及药物主要分布基本可以知道，口服盐酸林可霉素为什么更多的都被用于家禽消化道疾病的治疗了。
细菌对林可霉素和青霉素、头孢菌素、四环素类抗生素无交叉耐药性。
本品与庆大霉素联用，对葡萄球菌、链球菌等G+菌与G-菌混合感染有协同作用。
本品与大观霉素合用有协同作用，尤适用于需氧菌和厌氧菌导致的产科感染，如子宫内膜炎、乳腺炎、产褥热、产后无乳等。
本品属速效抑菌剂，不应与青霉素、头孢菌素类、氟喹诺酮类等繁殖期杀菌药联合使用，对后者有拮抗作用。
本品不能与大环内酯类、氟苯尼考以及泰妙菌素联用，因作用部位相同，互相竞争作用位点而有拮抗作用。
本品具有神经肌肉阻断作用，
不宜与氨基糖苷类和多肽类抗生素合用，可能加剧对神经-肌肉接头的阻滞作用。
本品不宜与抑制肠胃蠕动的止泻药合用，因可使肠内毒素延迟排出，导致腹泻加剧和时间延长。不宜与含白陶土的止泻药内服，因白陶土可使林可霉素的吸收减少90%以上。
本品不能与卡那霉素、新生霉素混合静注，也不能与氨苄西林、氨茶碱、葡萄糖酸钙合用，否则将发生配伍禁忌。
本品不可直接静脉推注。静注时必须用5% 葡萄糖注射液稀释。
不良反应
本品可引起以呕吐、腹泻为主的胃肠道反应，但较轻微。长期大量使用可致二重感染，发生假膜性肠炎，其先驱症状为腹泻，遇此症状应立即停药，口服甲硝唑可治愈。本品具有神经肌肉阻断作用，高浓度时可能导致骨骼肌麻痹。