猪胆盐的制备及应用

2020/1/16 7:56:08

背景及概述[1][2]

猪胆盐是中药名,出《名医别录》,为猪科动物猪Sus scrofa domesticaBrisson的胆汁。入肝、胆、肺、肝、大肠经。清热,解毒。治目赤,喉痹,肺热咳嗽,百日咳,哮喘,黄疸,痢疾,便秘。取汁冲服,6~9克。猪胆汁含猪胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸等。猪胆粉和胆酸钠对猫有止咳作用。胆酸钠对小鼠有祛痰作用。鹅去氧胆酸钠和胆酸对豚鼠有平喘作用。胆酸对豚鼠有抗过敏性休克作用。猪胆粉对动物有抗炎作用。胆酸盐对小鼠有抗惊厥作用。胆汁或胆盐口服可刺激胆汁分泌,增加肠蠕动。胆汁在体外对百日咳杆菌有抑制作用。猪胆盐是一种重要的生化试剂,可用作制备人工牛磺及胆酸钠的原料。利用已提取胆红素钙盐的滤渣提取猪胆盐,具有成本低廉,工艺简便,效益显著等特点。

制备[2]

取已提取胆红素钙盐的滤渣适量研碎,加9 倍量的水及1.5 倍量工业氢氧化钠,温火煮沸皂化1 h,使猪胆中胆汁酸、脂肪、蛋白及磷脂等水解完全,冷后,过滤,弃去少量不溶物残渣。在滤液中缓缓滴加少量30 % 过氧化氢脱色,待大量气泡停止后,放置过夜。在水解液中慢慢加入6 md·L,工业盐酸使p H 为2 -3 ,产生乳白色粘膏状物浮于上层。渡取上浮物加适量水煮沸15 m m,粘膏物沉下底部,倾去上面清液,将沉淀物用水洗至中性(2 ~ 3 次) ,加适量工业酒精溶解( 加热时小心) ,再加入20 % 氢氧化钠溶液至p H 为9 ~ 10 ,形成钠盐。回收酒精,浓缩,置80 一90 C 干燥,冷后研碎,得产品呈淡黄色粉末猪胆盐。

应用[3][4][5][6][7][8][9]

猪胆盐是一种重要的生化试剂,可用作制备人工牛磺及胆酸钠的原料,以及制备各种培养基,其应用举例如下:

1. 制备一种检测人体血液中微生物的培养基。所述检测人体血液中微生物的培养基,包括基础培养基和添加剂,以质量份数计,所述添加剂包括以下物质:蛋白胨5-15份,氯化钠2.5-7.5份,葡萄糖1-3份,乳糖0.5~4份、磷源1.5-3.5份,猪胆盐0.01~0.08份,甘露醇0.5~6份,丙酮酸钠1-3份,氨基酸1~6份,β-核糖苷酶底物1~8份、芒果提取液1~3份,金属盐0.02~0.58份,表面活性剂0.01~0.05份,pH值为7.2-7.5,蒸馏水1000份,用上述固体培养基可以通过菌落计数直接推断出血液中不同微生物的真实含量,从定量的角度准确判断出血液是处于带菌状态还是已经达到了致病浓度,使得检测结果的准确性进一步得到提高。

2. 制备一种霍乱弧菌增菌培养基。其每100mL培养基中包括如下含量的各组分:氯化钠0.5-2.0g,蛋白胨0.2-3.0g,甘露醇0.005-1.2g,1%亚碲酸钾5-40μl,蔗糖0.5-2.5g,庆大霉素30-60单位,脱氧胆酸盐0.05-0.08g,猪胆盐0.05-0.10g,甘氨酸0.376g,氢氧化钠0.0160-0.0672g,其余为蒸馏水,pH值为8.5-9.4。该培养基具有优异的增菌效果,可大大缩短增菌时间,其在30-37℃下增菌8-14小时可使活菌计数达到胶体金免疫层析法检测所要求含菌量106cfu/mL。

3. 制备一种富集乳酸杆菌的培养基。所述富集乳酸杆菌的培养基,包括基础培养基和添加剂,以质量份数计,所述添加剂包括以下物质:蛋白胨2~12份,氯化钠3~12份,肉汤20~50份,谷物发酵液20~80份,奶粉5~12份,葡萄糖2~8份,乳糖1~10份,磷源1.2~5.6份,猪胆盐0.02~0.15份,丙酮酸钠0.6~2.9份,氨基酸0.1~3.8份,抗生素0.1~2份,金属盐0.05~0.5份,表面活性剂0.01~0.05份,蒸馏水500份;首先通过谷物发酵液一直其它细菌的生长,实现乳酸菌的选择性生长,通过在培养基中加入丰富的营养物质,增大乳酸菌的生长活力,促进乳酸菌的生长,从而提高乳酸菌的产量,实现乳酸菌的富集,在工业化生产和检测中具有广阔的应用前景。

4. 制备一种用于培养脂肪干细胞的培养基。所述用于培养脂肪干细胞的培养基,包括基础培养基和添加剂,所述添加剂包括以下物质:蛋白胨,氯化钠,葡萄糖,乳糖、磷源,猪胆盐、甘露醇,丙酮酸钠,氨基酸,维生素,抗生素,金属盐,植物多糖,蒸馏水。本发明的培养基中含有植物多糖,不仅能够抑制除脂肪干细胞以外的其它细胞的生长,还能够促进脂肪干细胞的繁殖,有助于提高培养基中脂肪干细胞的浓度,缩短培养时间;通过各成分间协同作用,能提供细胞生长增殖所需的充足营养与良好环境,能够促进细胞的生长,还能够促进白蛋白的合成,长时间维持细胞活力。

5. 制备一种提高生物填料微生物活性的培养基。所述培养基由以下重量份的原料配比制成:蛋白胨100-150份、牛肉膏80-100份、酵母提取物10-20份、葡萄糖20-25份、氯化钠5-10份、琼脂20-30份、猪胆盐15-20份、水解酪蛋白12-18份、硝酸钠7-12份、磷酸二氢钾5-8份、氨基酸10-12份、增菌液16-20份。本发明制得的培养基容许生长的微生物种类丰富,为微生物提供了一个合适的生存环境,营养成分合理(N、P、K和微量元素),满足了微生物生长、繁殖过程中所需要的营养成分,使得微生物活性有较大的提高,异味处理效果好,在任何季节都能满足各地最严格的环保要求。

6. 制备一种大鼠代谢综合征模型。该制备方法包括如下步骤:将8周龄的雄性Wistar大鼠饲养在20-22℃环境中,并每天给与12小时光照,适应性喂养一周后,每天给予高脂肪饲料,连续喂养不少于18周,即得;该高脂肪饲料由以下重量份的原料组成:标准大鼠饲料60份、蛋黄粉8份、猪油12份、蔗糖12份、花生粉6份、牛奶粉1份、胆固醇1份、猪胆盐0.01份、棕榈油3份、椰子油3份。本发明采用长期给予大鼠高脂肪饲料方式,成功地诱导Wistar大鼠的脂代谢紊乱及肥胖,出现代谢综合征的临床表现,是建立大鼠代谢综合征模型的有效方法。

主要参考资料

[1] 简明中医辞典

[2] 彭爱芝, 何顺华. 提取猪胆盐的简便方法[J]. 湖南医科大学学报, 1994, 4.

[3]  CN201710605692.6 一种检测人体血液中微生物的培养基及其制备方法

[4] CN201610252236.3一种霍乱弧菌增菌培养基及其制备方法和应用

[5] CN201710605470.4一种富集乳酸杆菌的培养基及其制备方法

[6] CN201711237552.4一种用于培养脂肪干细胞的培养基及其制备方法

[7] CN201610352758.0一种提高生物填料微生物活性的培养基及其制备方法

[8] CN201611137803.7一种培养绿脓杆菌的培养基

[9] CN201710991144.1一种大鼠代谢综合征模型的制备方法及采用的饲料

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