基质金属蛋白酶-9(抗体)的应用

2021/12/2 11:16:00

背景[1-3]

基质金属蛋白酶-9(抗体)是一类可以特异性结合基质金属蛋白酶-9的多克隆抗体,主要用于体外基质金属蛋白酶-9的免疫学检测实验。

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase),基质金属蛋白酶是一个大家族,因其需要Ca2+、Zn2+等金属离子作为辅助因子而得名。

其家族成员具有相似的结构,一般由5个功能不同的结构域组成:(1)疏水信号肽序列;(2)前肽区,主要作用是保持酶原的稳定。当该区域被外源性酶切断后,MMPs酶原被激活;(3)催化活性区,有锌离子结合位点,对酶催化作用的发挥至关重要;(4)富含脯氨酸的铰链区;(5)羧基末端区,与酶的底物特异性有关。

基质金属蛋白酶-9免疫组化

其中酶催化活性区和前肽区具有高度保守性。MMPs成员上述结构的基础上各有特点。各种MMP间具有一定的底物特异性,但不是绝对的。同一种MMP可降解多种细胞外基质成份,而某一种细胞外基质成分又可被多种MMP降解,但不同酶的降解效率可不同。

MMPs几乎能降解细胞外基质(ECM)中的各种蛋白成分,破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障,在肿瘤侵袭转移中起关键性作用,从而在肿瘤浸润转移中的作用日益受到重视,被认为是该过程中主要的蛋白水解酶。MMPs家族已分离鉴别出26个成员,编号分别为MMP1~26。根据作用底物以及片断同源性,将MMPs分为6类,为胶原酶、明胶酶、基质降解素、基质溶解素、furin活化的MMP和其他分泌型MMP。

应用[4][5]

用于bFGF、MMP-9、TIMP-1在肺癌患者血清中的表达及意义研究

探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)在肺癌患者和健康人的血清样本中的含量差异及其与肿瘤分化程度、临床分期、远处转移等病理特征的相关性,明确其对肺癌发生、发展的临床意义。

方法:1、收集收集肺癌患者的血清标本,收集标本时患者均未接受手术、化疗、放疗治疗。其中男性33例、女性30例;年龄为38岁-78岁,中位年龄59岁,平均年龄为57.46±7.48岁,分为三组:<45岁16例、45岁-65岁22例、>65岁25例;按照病理类型分为2组:非小细胞肺癌组34例(其中鳞癌14例、腺癌17例、细支气管肺泡癌3例)、小细胞肺癌组29例;按照分期标准分为3组:I+II期17例、III期20例、IV期26例;按照淋巴结转移情况分为2组:N1+N2期37例、N3期26例;按照有无远处转移情况分为:有远处转移者26例、无远处转移者37例;

按照分化程度分为3组:低分化组24例、中分化组15例、高分化组24例;按照肿瘤大小范围3组:<3cm18例、3cm-5cm25例、>5cm20例;按照吸烟情况分为2组:有吸烟者39例、无吸烟者24例。参与试验患者排除条件:①已经放、化疗治疗的患者;②COPD、哮喘、肺心病、肺间质纤维化患者;③有明确结缔组织疾病的患者;④有冠心病、糖尿病病史的患者。

同时收集43例健康人的血清标本作为对照组,其中男性23例、女性20例;年龄为39岁-80岁、中位年龄57岁,平均年龄为53.46±7.26岁,分为三组:<45岁11例、45岁-65岁14例、>65岁18例;按照吸烟情况分为两组:有吸烟者21例、无吸烟者22例。

2、所有患者均在未接受任何治疗的情况下,空腹抽取外周静脉血5ml入不加抗凝剂的干燥无菌管中。所有标本均在采集后室温放置30mim后,2小时内2000r/min离心10分钟,然后用无菌吸管将血清吸取移放在2.0ml的EP管内,编号密封置于-80℃冰箱中保存待测。

标本收集过程中注意避免反复冻融。3、采用酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunoadsorbent assay ELISA)双抗体夹心法检测健康者43例(正常对照组)、肺癌患者63例(肺癌组)血清样本中的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量,含量结果以pg/ml表示。

参考文献

[1]Current evidence on the relationship between five polymorphisms in the matrix metalloproteinases(MMP)gene and lung cancer risk:A meta-analysis[J].Chaoliang Hu,Jianmiao Wang,Yuzhu Xu,Xiaochen Li,Huilong Chen,Hansvin Bunjhoo,Weining Xiong,Yongjian Xu,Jianping Zhao.Gene.2013(1)

[2]Expression,prognostic and predictive impact of VEGF and bFGF in non-small cell lung cancer[J].Fadi S.Farhat,Arafat Tfayli,Najla Fakhruddin,Rami Mahfouz,Zaher K.Otrock,Raafat S.Alameddine,Ahmad H.Awada,Ali Shamseddine.Critical Reviews in Oncology/Hematology.2012(2)

[3]Cancer statistics for Hispanics/Latinos,2012[J].Rebecca Siegel,Deepa Naishadham,Ahmedin Jemal.CA:A Cancer Journal for Clinicians.2012(5)

[4]Estimates of worldwide burden of cancer in 2008:GLOBOCAN 2008.[J].Ferlay Jacques,Shin Hai-Rim,Bray Freddie,Forman David,Mathers Colin,Parkin Donald Maxwell.International journal of cancer.2010(12)

[5]王小军.bFGF、MMP-9、TIMP-1在肺癌患者血清中的表达及意义[D].宁夏医科大学,2013.

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