柴胡皂甙B2的制备方法

2021/12/9 9:39:07

背景及概述[1]

柴胡皂甙B2即柴胡皂苷B2,白色针状结晶物,其分子式为C42H68O13,分子量为780.99,是柴胡中柴胡皂苷D的转化成分。具有较好的抗炎、抗肿瘤、抗病毒和免疫抑制的药理作用。目前人们普遍认为柴胡中的主要活性成分是柴胡皂苷A、柴胡皂苷D,然而这种认识是基于天然产物角度的理解,并未体现出柴胡的中药属性。柴胡在临床应用中多是与其他药物配伍以复方的形式,通过煎煮给药,而在煎煮过程中柴胡皂苷A、柴胡皂苷D会分别转变为柴胡皂苷B1、柴胡皂苷B2,且柴胡皂苷D较多的转化为柴胡皂苷B2,因此在很多含柴胡复方中柴胡皂苷D的含量很低甚至检测不到,而其转化物柴胡皂苷B2的含量却很高。由此,可推测柴胡皂苷B2可能才是柴胡的主要活性成分之一,而不是柴胡皂苷D。

制备[2][4]

报道一、

柴胡皂苷b2纯品的制备

取柴胡药材2.5kg,加入浓度为30%的乙醇20L,加热回流提取2h,过滤,药渣以同样的方法先后提取3次,最后合并提取液,药渣弃去,提取液回收乙醇,得稠膏0.31kg。

取上述稠膏0.31kg,加水10L稀释,上AB-8大孔吸附树脂,树脂量20L(水中体积),树脂柱径高比为1∶6,吸附流速2BV/h,先用2%的NaOH洗脱10BV,流速2BV/h,再用水洗脱至流出液为中性,接着用25%的乙醇洗脱8BV,流速3BV/h;最后用90%的乙醇洗脱6BV,流速3BV/h,收集该部分洗脱液,回收溶剂,得柴胡皂苷b2粗品0.14kg。

柴胡皂苷b2纯品的制备采用柱层析和重结晶联用的方法制备。柱层析时使用的吸附剂为硅胶G(青岛海洋化工厂生产,4.5kg,100~105℃活化2小时)。取上述柴胡皂苷粗品0.14kg,拌入到0.55kg160~200目的硅胶中,挥干溶剂,得拌样硅胶,湿法上样(色谱柱直径高比1∶6)。以7∶2∶0.2氯仿-甲醇-水的混合溶剂洗脱,收集洗脱液,每份250mL,共收集80份,每份减压浓缩至小体积后,用薄层色谱检查。薄层色谱条件:反相硅胶预制板;展开剂:50%甲醇/水溶液。其中第25~35份中柴胡皂苷b2的含量较高,将其合并,减压抽干得柴胡皂苷b2的精品白色粉末0.013kg。

取柴胡皂苷b2的精品0.013kg,用少量甲醇溶解,于6∶4丙酮-水的混合溶剂中重结晶,过滤,干燥,得0.009kg的柴胡皂苷b2纯品,为白色颗粒状结晶。

报道二、

柴胡总皂苷提取物制备工艺:

取柴胡饮片1kg,0.4%NaOH-50%乙醇10L回流提取3次,每次提取1小时,减压回收溶剂,得提取物,加水分散溶解,使水溶液稀释倍数为1∶14(以生药量计),通过8LAB-8大孔吸附树脂,吸附流速3BV/h,树脂柱径高比为1∶8,上样量为0.125g/mL(以生药量计),50%乙醇洗脱4倍树脂体积进行除杂,除杂流速为3BV/h,90%乙醇洗脱5倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集90%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为柴胡总皂苷提取物。测定柴胡总皂苷提取物中总皂苷含量为62%,其中柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d三种成分的含量之和为25%。

应用[3]

柴胡皂苷B2对于肾纤维化的预防或治疗作用。柴胡皂苷B2包括以下应用:a1:制备预防和/或治疗肾组织纤维化的药物;a2:预防和/或治疗肾组织纤维化;a3:抑制Hedgehog信号通路;a4:建立肾组织纤维化动物医学模型。本发明首次公开了SSB2的新用途,为SSB2抑制肾纤维化的药理作用提供了理论依据。

参考文献

[1][中国发明]CN201910524655.1柴胡皂苷B2在制备抗抑郁症药物中的应用

[2][中国发明,中国发明授权]CN200810049506.6柴胡皂苷b2的提取分离方法

[3]CN201910966624.1柴胡皂苷B2在制备预防或治疗肾纤维化药物中的应用

[4]CN200710111230.5柴胡总皂苷提取物及其制备方法

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