菊粉酶的性质研究

2022/2/8 17:03:50

菊粉酶是一类能水解菊粉生产果糖和果聚糖的酶。

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分布

分泌菊粉酶的微生物在自然界中分布很广,土壤、水和动物消化道中的多种微生物都能分泌。

性质研究

关于菊粉酶酶学性质的研究结果表明:根据菊粉酶酶切多聚果糖的方式分为外切和内切菊粉酶,作用后分别得到果糖和果糖与低聚糖混合物,已知一种来自曲霉(Aspergillus)内切菊粉酶商品酶粗试剂的分子量53KDa,Km=19mM,而同一种来源的外切菊粉酶分子量81KDa,Km=60mM,纯化后内切酶和外切酶Km分别降为6和10mM;Fe3+可以使纯化的内切菊粉酶活性提高20倍,Mn+和Mg+则能部分抑制此二种酶的活性;很多菊粉酶几乎都同时具有转化酶活性,内切型酶的菊粉酶与转化酶活性比I/S=1/0.2,外切酶的I/S=1/8(Rosa Azhari,Alada M.Szlak,EhudIlan,Samuel Sideman,and Noah Lotan.,Purification andcharacterization of endo-and exo-inulinase Biotechnology andApplied Biochemistry,1989,11:105-117.);

更早一些时候,就有报道曲霉菊粉酶最适反应温度为60℃,最适反应pH值为4.4(Starch.1981,33:373-377,Enzymatic hydrolysis of inulin-analternative way to fructose production,L.Zittan);另据报道,一种产菊粉酶的黑曲霉在摇床水平下,30℃*140rpm,至第5天(120h)酶活达到27U/ml,第7天(168h)酶活达到高峰为48.4U/ml,生物量达到28.8g/l(Kazuyoshi Ohta,Shigeyuki Hamada,and Toyohiko Nakamura.Production of high concentrations of ethanol from inulin bysimultaneous Saccharification and fermentation using Aspergillusniger and Saccharomyces cerevisiae.Applied and EnvironmentalMicrobiology,1993,59:729-733)。

最近报道认为:一种产菊粉酶的黑曲霉在摇瓶水平下,28℃*200rpm,菊粉酶在0-120h之间从0直线上升至48U/ml,之后则保持稳定,至第7天(168h)达到50U/ml的高峰值,>55℃的耐温性较差,60℃*1h下,残余活性仅78%,70℃*1h下酶活几乎为0,60℃的菊粉酶半衰期为71min;最适反应pH值为5.0,在pH5.0-5.8范围内菊粉酶稳定性很好;Na+能够使酶活性提高15%,Ca2+、Zn2+、Cu2+、Fe3+无明显影响,Ba2+、Mn2+、pb2+、Ag1+使酶活性显著下降(Gaye Ongen-Baysal,S.Suha Sukan,Nikolay Vassilev.,Productionand properties of inulinase from Aspergillus niger.BiotechnologyLetters,1994,16:275-280)。

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