背景[1-3]
磷酸酯酶3蛋白抗体是一类可以特异性结合磷酸酯酶3蛋白的多克隆抗体，主要用于体外检测磷酸酯酶3蛋白的免疫学实验。
磷酸脂酶phosphatase磷酸脂酶是一类水解酶，水解由磷酸所形成的各种脂的酶。磷酸二酯酶是一个家族，含有磷酸二酯酶1、磷酸二酯酶2、磷酸二酯酶3等。磷酸二酯酶4和磷酸二酯酶5如果给予充分抑制，就会起到相应的治疗疾病的作用。
磷酸二酯酶（PDEs）具有水解细胞内第二信使（cAMP,环磷酸腺苷或cGMP,环磷酸鸟苷）的功能，降解细胞内cAMP或cGMP，从而终结这些第二信使所传导的生化作用。cAMP和cGMP对于细胞活动起着重要的调节作用。而其浓度的调节主要由腺苷酸环化酶的合成和磷酸二酯酶(PDEs)水解作用之间的平衡决定。PDEs在人体内分布广泛，生理作用涉及多个研究领域。近年来，PDEs作为新的治疗靶点，引起了众多学者广泛的关注，成为一个新的研究热点，选择性PDE 4和PDE 5抑制剂的临床研究受到格外的重视。
磷酸酯酶3蛋白免疫组化
人类PDE3的两种同功酶PDE3A和PDE3B是分别位于染色体1 2和11上的不同基因的产物。PDE3A和PDE3B的催化区域均包含一互不相同的44个氮基酸插入段。这44个氨基酸的不同不仅使PDE3A和PDE3B相互区分，亦使PDE3的催化部位有别于其它类型的PDEs。PDE3A和PDE3B的mRNA分布于不同的组织和细胞：在血小板、心脏和血管平滑肌富含PDE3A，而PDE3B主要分布在脂肪细胞和T淋巴细胞“许多PDE3抑制剂被视作强效血管扩张剂和兼有抗血小板活性的药物而用于治疗心衰，然而，前瞻性的随机的Milrinone生存评估测试显示：反复口服给予PDE3抑制剂Milrlnone会增加心衰病人的死亡率。故仅少数PDE3抑制剂如Milrinone、Aminone、Enoximone可以急性、短期静脉给药治疗心衰，同时须密切监测病人是否会出现室性心律失常增加的情况。PDE3B抑制剂可调节T淋巴细胞功能，人类T细胞以PDE3和PDE4占优势，PDE3和PDE4抑制剂相互协同，能强有力地抑制T细胞受体介导的细胞因子的产生和有丝分裂的扩增。
应用[4][5]
用于重组细胞生长因子结构与功能关系的研究
HAPO蛋白最初是从再生障碍性贫血病人尿液中提取的天然蛋白，我室对其功能进行了深入的研究后成功地构建了原核表达体系，并测定了重组蛋白的细胞因子活性。N端测序显示HAPO蛋白是糖蛋白4（proteoglycan 4，PRG4）的一个不同剪接体形式。
HAPO蛋白N端为由PRG4第2、3外显子编码的两个促细胞生成素B结构域（Somatomedin B，SMB），中间为第4外显子编码的假定的肝素结合区（putative Heparin Binding Domain，pHBD），C端为第6外显子编码的黏液素样重复序列。PRG4尚有若干剪接体形式，其中有两种为第4、5外显子同时缺失和3、4、5三个外显子同时缺失。
这为表达缺失突变蛋白以研究rhHAPO各个结构域的功能提供了条件。目前国内外对HAPO蛋白的各项研究课题主要集中在本实验室以及与香港和法国等实验室的合作上，工作的重点在于临床实验探讨HAPO与疾病的相关性，体内外实验探讨HAPO生理功能等。已制备得到单克隆抗体，钓得受体，发现下游信号传导途径之一为磷酸酯酶3激酶ATP途径等等，但是对于其结构的研究是一个空白。
仅仅局限于NCBI网站BLAST数据库搜索程序给出的关于HAPO蛋白含有4个结构域的信息。因此，rhHAPO结构和功能相结合的研究将能够更好的理解与HAPO蛋白相关的各种实验现象、实验结果。
在分子克隆构建原核表达体系基础上，利用HPLC，MALDI-TOF-MS，CD，DLS等实验技术研究了以下四个版块的内容，彼此之间有交叉和衔接：单体分子四个结构域的结构特点对功能发挥的影响；不同聚集体分子功能的比较；不同剪接体蛋白对聚集行为的影响；验证假定的肝素结合区（pHBD）是否结合肝素。
参考文献
[1]Vascular endothelial cells express a functional fas-receptor due to lack of hemodynamic forces[J].M.-A.Freyberg,D.Kaiser,R.Graf,P.Friedl.APOPTOSIS.2001(5)
[2]Modulation of Endothelial Cell Survival by an Inhibitor of Angiogenesis Thrombospondin-1:a Dynamic Balance[J].O.V.Volpert.Cancer and Metastasis Reviews.2000(1)
[3]Spontaneous transformation and immortalization of human endothelial cells[J].Kimiko Takahashi,Yoshio Sawasaki,Jun-Ichi Hata,Kiyoshi Mukai,Tamotsu Goto.In Vitro Cellular&Developmental Biology.1990(3)
[4]Phenolics with PPAR-γligand-Binding activity obtained from licorice（Glycyrrhiza uralensis Roots）and ameliorative effects of glycyrin on genetically diabetic KK-A y mice[J].Minpei Kuroda,Yoshihiro Mimaki,Yutaka Sashida,Tatsumasa Mae,Hideyuki Kishida,Tozo Nishiyama,Misuzu Tsukagawa,Eisaku Konishi,Kazuma Takahashi,Teruo Kawada,Kaku Nakagawa,Mikio Kitahara.Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters.2003(24)
[5]王黎芳.重组细胞生长因子结构与功能关系的研究[D].中国协和医科大学,2006.