背景及概述[1][2]
长春质碱是长春花生物碱中的一种，动物实验表明其具有降压作用，是合成临床上广泛应用的抗肿瘤药物酒石酸长春瑞滨、硫酸长春碱和长春新碱的重要起始原料之一，具有广泛的应用价值。由于长春质碱不稳定，容易分解，故一般将其与酒石酸成盐，形成稳定的长春质碱酒石酸盐（也称为酒石酸长春质碱）。
制备[1]
酒石酸长春质碱的制备。
由于长春质碱酒石酸盐极为难溶，一般的溶剂例如水、苯类、醇类、醚类、氯代甲烷、烷烃等都很难将其溶解，这为长春质碱酒石酸盐的进一步纯化带来了很大的难题。故要想得到高纯度的98%以上的长春质碱酒石酸盐，因此需要将长春质碱通过柱层析、离子交换树脂、大孔树脂等色谱层析技术纯化成98%以上，然后成盐，以得到高纯度的98%以上的长春质碱酒石酸盐。这种方法纯化步骤繁琐、耗费时间长、长春质碱收率低，不适于工业化生产。
CN201410761229.7提供了一种长春质碱酒石酸盐的制备方法，该方法以长春花全株为原料，工艺简单，所得长春质碱酒石酸盐提取率高、纯度高。本发明以新鲜的长春花全株为起始原料，增大了长春质碱的含量，通过提取、pH萃取分离纯化可以得到纯度78%左右的长春质碱粗品，再通过成盐、重结晶即可直接得到99%以上高纯度的、且易于保存的长春质碱酒石酸盐。本发明不使用色谱分离柱，简化了工艺流程，降低了成本。
本发明具体技术方案如下：一种长春质碱酒石酸盐的制备方法，包括以下步骤：
（1）取新鲜的长春花全株，用氯化钠水溶液超声浸泡，然后取出直接放入流速为5-8m/s的-15～-25℃的冷空气中冷冻干燥，冷冻干燥后将长春花全株粉碎；
（2）将步骤（1）的长春花全株粉末加入水中，调节pH为1.3-1.6，超声浸泡2-3h，过滤取滤液，将滤液调整pH为8-9，然后以喷雾的形式从萃取罐顶部喷入，同时将萃取剂以喷雾的形式从萃取罐的下部喷入，喷入完毕萃取收集有机相；所述萃取剂为正溴丙烷和乙醇的混合物；
（3）将有机相减压除去溶剂，剩余物用无水乙醇完全溶解，加入硫酸的乙醇溶液调节pH至3.8-4.1，静置、分离，取滤液；
（4）将步骤（3）的滤液减压蒸干，剩余物用水溶解，调pH为1.5-2.5，搅拌，至溶液澄清，然后用二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液萃取，取水相，水相调pH至4.5-4.8，然后用甲苯和石油醚的混合液萃取，将所得有机相减压蒸干，得长春质碱粗品；
（5）将长春质碱粗品用甲醇溶解，然后向其中加入酒石酸的甲醇溶液，超声反应，析晶，得长春质碱酒石酸盐；
（6）将长春质碱酒石酸盐加入到N,N-二甲基甲酰胺中，加热至全溶，然后加入甲醇和乙酸乙酯的混合液，搅拌均匀后重结晶，所得晶体即为长春质碱酒石酸盐纯品。图1为所得纯化产品的红外谱图。
诱导培养基[2]
目前，细胞培养技术被认为是生产长春花药用成分最有效的途径，但细胞培养中有效成分含量很低，为了更有效的生产长春花生物碱，如何提高长春花药用成分的 产量已成为近年来国内外研究的热点。
CN201611028177.8旨在针对现有技术的技术缺陷，提供一种诱导长春花细胞分泌长春质碱的合成培养基，以解决现有技术中长春花细胞离体培养时细胞生长缓慢的技术问题。本发明要解决的另一技术问题是现有技术中长春花细胞离体培养时长春质碱产率较低。为实现以上技术目的，
本发明采用以下技术方案：一种诱导长春花细胞分泌长春质碱的合成培养基，该培养基含有MS培养基的成分，同时还含有植物激素2.4-D 2mg/L，植物激素KT 1mg/L，色氨酸50mg/L，辅酶A 3mg/L，萘 普生8.4mg/L、阿司匹林0.3mg/L、布洛芬5.0mg/L。
在以上技术方案中，所述MS培养基可以依据本领域的一般技术常识进行配制，当 然也可以采用以下具体配方的MS培养基：NH4NO3 1650mg/L，KNO3 1900mg/L，CaCl2·2H2O 440mg/L，MgSO4·7H2O 370mg/L，KH2PO4 170mg/L，KI 0.83mg/L，H3BO3 6.2mg/L，MnSO4·4H2O 22.3mg/L，ZnSO4·7 H2O 8.6mg/L，Na2MoO4·2 H2O 0.25mg/L，CuSO4·5 H2O 0.025mg/L， CoCl2·6 H2O 0.025mg/L，FeSO4·7 H2O 27.8mg/L，Na2-EDTA·2 H2O 37.3mg/L，肌醇100mg/L，烟酸0.5mg/L，维生素B6 0.5mg/L，维生素B1 0.1mg/L，甘氨酸2mg/L，水余量。本发明以创新性的技术改进实现了良好的技术效果，同时其成本较低、易于实现，因此具有良好的推广前景。
主要参考资料
[1] CN201410761229.7 一种长春质碱酒石酸盐的制备方法
[2] CN201611028177.8 一种诱导长春花细胞分泌长春质碱的合成培养基