背景[1]
Recombinant Rat IFN-γ是细胞和机体在收到病毒侵染的时候分泌的一种具有广谱抗病毒作用的糖蛋白。由淋巴细胞分泌，主要参与分泌主要组织相容性抗原（MHC）的表达和免疫调节。已有文献指出，Recombinant Rat IFN-γ与Recombinant Rat TNF-α相互作用能够改变肠道的上皮细胞的结构和屏障功能，使得肠粘膜的通气性增加。在许多肠道炎症中，Recombinant Rat IFN-γ的表达增加。
在衣原体感染中的作用[2]
Recombinant Rat IFN-γ生物活性十分广泛，在免疫应答和免疫调节过程中发挥重要作用。鼠生殖道感染鼠衣原体的动物模型显示，细胞介导的免疫反应是宿主抵抗衣原体感染的主要免疫机制，而Recombinant Rat IFN-γ是清除衣原体感染最主要的细胞因子。Recombinant Rat IFN-γ和Recombinant Rat IFN-γ受体基因缺陷的乳鼠感染鼠衣原体后易引起衣原体在体内播散，2周内病死率达100%。许多体外试验已证明高浓度IFN-γ完全抑制衣原体生长；导致持续感染，使网状体发生异变，发展成无感染性的非典型形态的RB，但仍有代谢活性。去除Recombinant Rat IFN-γ后，非典型形态的RB又能恢复原生长活性继续以二分裂方式进行分裂、繁殖，释放具有感染性的原体（EB）。但不同的衣原体菌株对Recombinant Rat IFN-γ的敏感性不同，机体清除Ct呈IFN-γ依赖性，而清除鼠衣原体呈非IFN-γ依赖性。其他因素如宿主细胞极化状态以及宿主遗传背景也影响Recombinant Rat IFN-γ抗衣原体感染的敏感性。
基因克隆、测序及辐射诱导表达质粒pIRESEgr-IFNγ的构建[3]
方法 :利用逆转录多聚酶链反应 (RT- PCR) 法 , 以小鼠脾细胞 m RNA为模板 , 扩增获得全长IFNγc DNA, 与 p GEMT载体连接做全自动测序 , 并利用基因重组技术构建含 Egr- 1启动子的辐射诱导表达质粒p IRESEgr- IFNγ。
结果 :经测序证实获得的小鼠 IFNγ c DNA序列与文献报道完全一致 , 并构建了含 Egr- 1启动子的辐射诱导表达质粒 p IRESEgr- IFNγ。结论 :成功克隆了小鼠 IFNγ的 c DNA序列 , 构建了辐射诱导表达质粒p IRESEgr- IFNγ。
酶切鉴定
参考文献
[1] TNF-α、IFN-γ通过激活骨髓间充质干细胞NF-κB/STAT3通路调控DSS诱导小鼠肠炎的炎症反应.李娟.厦门大学2014
[2] γ干扰素抗衣原体感染作用的研究进展,唐国芳，李忠玉，2009
[3]IFN-γ基因克隆、测序及辐射诱导表达质粒pIRESEgr-IFNγ的构建.刘林林,杨巍,2004