背景及概述[1]
1936年，首次报道了含羞草植物中存在含羞草素。银合欢植物富含多酚氧化物、叶绿素、多糖、蛋白质等，其种子中粗蛋白质含量为30％～32％、含羞草素3％～5％，叶片中粗蛋白质含量为22％～29％、含羞草素3％～6％。银合欢为世界著名的高蛋白饲料植物，由于叶片富含羞草素，导致禽畜(尤其是非反刍动物)食用银合欢后常发生脱毛、白内障、生长缓慢及生殖障碍等症状，限制了银合欢在畜牧业上的广泛应用。但另一方面，含羞草素具有多方面的生理活性，它的某些生理活性已被开发利用，如：工业上用作脱毛剂等。目前，市面上试剂级含羞草素的价格约为每100毫克565元。含羞草素最初是1936年从含羞草中提取得到的，从银合欢种子取则始于R.Yoshida。1951年建立了测定含羞草素的快速比色法。1965年首次测定不同银合欢种质叶片和种子中的含羞草素含量。1978年建立了银合欢叶片含羞草素测定的自动比色法。我国利用氯化铁法，测定了新银合欢和肯宁汉姆银合欢枝和叶片中的含羞草素含量。
制备[1]
一种提取和纯化银合欢叶片含羞草素的方法，该方法包括以下步骤：
步：采集银合欢健康枝条上的第1至3蓬全展叶片，取样1.0kg；
第二步：将叶片于39℃～40℃烘干至恒重，用粉碎机粉碎过筛后用于含羞草素提取；
第三步：称取经粉碎过筛的样品100g，放入1000mL带塞瓶中，加蒸馏水500mL；
第四步：在带有可摇摆的恒温水浴中保温，先摇摆，再静置保温浸提16～17h；
第五步：离心，收集上清液；
第六步：用盐酸将上清液调至pH5，加入乙醇，混均并在4℃条件下放置2d；
第七步：离心收集上清液，并用真空泵减压浓缩至20mL，浓缩液在4℃条件下，静置3d；
第八步：离心收集结晶物，用蒸馏水洗涤，分别离心收集结晶物，室温条件下真空干燥至恒重；
第九步：取结晶物2g放入500mL烧杯中，加入200mL蒸馏水，加热直完全溶解。趁热时，将溶解液转入装有粉状活性炭的过滤柱过滤，并收集滤液；
第十步：将滤液减压浓缩至100mL，并4℃条件下，静置3d；
第十一步：离心收集结晶物，用蒸馏水洗涤，室温真空干燥到恒重，获得白色晶体。
应用[2]
含羞草素从含羞草或银合欢中提炼的植物氨基酸。它具有与胸腺嘧啶高度相似的化学结构，可竞争性地与腺嘌呤结合，从而阻碍DNA的合成，使细胞阻滞在G1/S点。研究表明含羞草素能将PC-3细胞阻滞在G1期，LNCaP细胞阻滞在S期。同时，含羞草能够抑制K562，7402等多种肿瘤细胞生长，并可其诱导凋亡。有实验以人肝癌QGY-7703细胞株为研究对象，考察含羞草素阻断对周期同步化的作用。并与胸腺嘧啶脱氧核苷阻断法相对照，研究含羞草素阻断去除后对QGY-7703细胞周期的影响。结果显示：QGY-7703细胞在含羞草素阻断后释放的第10h进入S期，第20h进入G2/M期，且最高同步率分别为G1期94.6％，S期86％。含羞草素能较好地使肝癌细胞株QGY-7703同步化于G1期和S期。
毒性及降毒方法[3]
含羞草素是一种氨基酸类毒素，它存在于银合欢种子、叶片和根系等器官中，并对非反刍动物和瘤胃无降解银合欢能力的反刍动物有毒。反刍动物银合欢的典型中毒症状包括脱毛、厌食、体重下降、流涎、食道损伤、甲状腺肿大、血液中甲状腺素浓度降低、生殖障碍等。通常动物日粮中含5%～10%银合欢，反刍动物日粮不超过30%，不会引起明显中毒症状。
近年来，国内外对银合欢进行降毒研究并取得一些成果。陈秀兰等将银合欢种子和种仁经水煮1h，含羞草素分别降低57.34%和97.28%，蛋白质分别损失6.06%和14.89%。银合欢饲料可用内生性降解酶的作用，通过传统的堆积发酵技术使鲜贮的银合欢嫩叶含羞草素降解50%。含羞草素易与Fe3+、Al3+、Cu2+、Zn2+等金属离子熬合，可在银合欢饲料中加入矿物质使含羞草素失活。将不毒的反刍动物胃液转灌至易中毒的反刍动物胃中，使后者能完全克服银合欢毒性。瘤胃细菌降解含羞草素和二羟基吡啶化合物的功能已被证实，首先从瘤胃中分离出具有这种脱毒能力的细菌。在我国广西涠洲岛，从黄牛和山羊瘤胃中亦发现DPH降解菌，并成功地转灌至广西大陆的黄牛和山羊瘤胃中。从采食不引起中毒银合欢的黄牛瘤胃中分离出牛链球菌(StreptococcusbovisOrla-Jensen)、生孢梭菌和乳杆菌(LactobacillusBeijerinck)新种能降解含羞草素、3，4-DHP[3-羟基-4-(1氢)吡啶酮，简称DHP]和2，3-DHP[2，3-二羟基吡啶]，每个菌株都能降解含羞草素和DHP。另外，食用菌丝对含羞草素有明显的降解作用，用水浸泡去毒，补充血液中的甲状腺素(T4)或碘等可减轻银合欢的中毒症状。
主要参考资料
[1] CN201310134483.X一种提取和纯化银合欢叶片含羞草素的方法
[2] 含羞草素对肝癌细胞ＱＧＹ－７７０３周期同步化的作用
[3] 我国银合欢研究进展