磺酰罗丹明B的合成和应用

2023/5/11 9:14:57

简介

磺酰罗丹明B是一种高度水溶性,非固定的红色荧光极性示踪剂。其用于细胞形态调查、荧光脂质体制备、细胞-细胞间通信研究和接下来的吞噬体-溶酶体摄取和融合。磺酰罗丹明B也是一种优秀的蛋白染料用于培养细胞的胞内蛋白定量,这一颜色强烈和水溶性的染料特别适用于基于体外细胞的抗肿瘤药物筛选。它能够与细胞蛋白上的碱性氨基酸结合,对结合染料的显色测定能够预测总蛋白与细胞量之间的关系。该测定方法简单、重复性好,且末端终点检测法对时间要求不是特严格,相对于四唑衍生物检测法是一种显著的优势。磺酰罗丹明B法特别适用于大规模筛选天然提取物或合成化合物来源的抗肿瘤候选药物[1]。

合成

图2磺酰罗丹明B的合成路线

图2磺酰罗丹明B的合成路线

将SRhB(0.012 g)和0.01 g 4-二甲氨基吡啶加入3 mL干燥吡啶(Sigma,99%)中。将混合物搅拌30分钟。注入10μL氨基硅烷。让混合物反应3小时。通过硅胶柱(100-200目,60Å,Sigma-Aldrich,洗脱液:5/1氯仿/甲醇溶剂)洗脱纯化产物磺酰罗丹明B。合成路线如图2所示[2]。

应用

磺酰罗丹明B是一种粉红色蛋白质结合染料,在弱酸性条件下可与细胞蛋白质中的碱性氨基酸结合,在弱碱性条件下,可被溶解,吸光值反映蛋白质含量,代表细胞数量。因此,磺酰罗丹明B法(SRB法)是于1990年建立的一种细胞活力检测方法,并因其具备快速、信号稳定、成本低廉等优点而获得了广泛的应用,尤其是在肿瘤研究领域。SRB法是近年来推荐的一种较新的筛选抗癌药物的方法,现已扩大应用到检测细胞数量和活性。对此方法的检测条件如细胞数量、波长、是否加用参考波长,因细胞株的不同和其他因素的影响,文献报道不一。但是SRB法在化妆品研究领域,法却很少有人使用,也缺乏对法和法应用于皮肤细胞的比较[1]。

参考文献

[1] 张乃钲,王艳秋,徐胜利,陈彪.磺酰罗丹明法检测多巴胺能神经细胞的条件[J].中国行为医学科学,2005(01):98-100.

[2] Jin, Shengye; et al. Single-molecule interfacial electron transfer in donor-bridge-nanoparticle acceptor complexes. Journal of Physical Chemistry B (2010), 114(45), 14309-14319.

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