背景及概述[1]
R547（[4-氨基-2-[(1-甲磺酰基哌啶-4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮）是CDK1、2、4、7和9的有效抑制剂，在临床前模型中显示出广泛的抗肿瘤活性。该Ia期研究评估了安全性，药代动力学（PK）和药效学（PD）终点。方法是：R547（[4-氨基-2-[(1-甲磺酰基哌啶-4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮）给予90或180分钟输注D1，D8（21天周期）。结果显示41例患者在剂量范围8.6-195 mg / m2耐受R547（[4-氨基-2-[(1-甲磺酰基哌啶-4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮）。
不良反应[1]
主要相关事件为恶心（54％），疲劳（34％），呕吐（34％），头痛（34％）和低血压（32％）。
药代动力学[1]
PK：20个患者的平均AUC，PK接受≥155mg/ m 2 R547（[4-氨基-2-[(1-甲磺酰基哌啶-4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮）超过异种移植研究中有效的暴露。在等效剂量下，180分钟的时间产生相等的AUC，但Cmax减少30％。
PD：对于患者，在R547（[4-氨基-2-[(1-甲磺酰基哌啶-4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮）后1.5至24小时观察到pRB /总RB比率的暴露依赖性降低。
制备[2]
步骤1：4-氨基-2-乙基硫烷基嘧啶-5-羧酸甲氧基甲基酰胺（8）的制备
向4-氨基-2-乙硫基嘧啶-5-羧酸（7）（1.00g，5.02mmol）和二异丙基乙胺（2.79g，21.58mmol，4当量）的DMF（20mL）溶液中加入1-羟基苯并三唑（在0℃下，加入1.09g，8.07mmol，1.5当量）和O-苯并三唑-1-基-N，N，N，N-四甲基脲六氟磷酸盐（3.06g，8.07mmol，1.5当量）。搅拌15分钟后，加入N，O-二甲基羟胺盐酸盐（790mg，8.10mmol），将反应物在0-20℃下搅拌2小时。将得到的反应混合物用H2O处理，并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，用Na2SO 4干燥并浓缩。将粗产物在硅胶上用己烷/ EtOAc（1：1）纯化，得到8，为白色固体（1.19g）：4-氨基-2-乙基硫烷基嘧啶-5-羧酸甲氧基甲基酰胺（8），产率98％。
第2步（4-氨基-2-乙基硫基嘧啶-5-基）（2-甲氧基苯基）-甲酮（10c）的制备
在30分钟内向1.6M的正丁基锂的己烷溶液（51.0mL，81.6mmol）中加入2-碘苯甲醚（20.0g，85.47mmol）的无水THF（130mL）溶液，搅拌混合物在-78℃下再进行40分钟，得到澄清溶液。将一部分新制备的2-甲氧基苯基锂试剂（70.0mL，~30mmol，~3.5当量）缓慢加入到酰胺8（2.07g，8.54mmol）的无水THF（30mL）溶液中并搅拌混合物在-78℃下保持1-2小时直至完全消耗酰胺8，将所得混合物用NH4Cl水溶液淬灭并用EtOAc（3x）萃取。将合并的有机萃取液用盐水（2x）洗涤，用Na2SO4干燥并蒸发。将残余物在硅胶上用己烷/ EtOAc（80/20（60/40））纯化，得到10c，为浅黄色固体（1.85g）
第3步（4-氨基-2-乙磺酰基嘧啶-5-基）（2-甲氧基苯基）-甲酮（11c）的制备
冷却的10c溶液（2.66g，9.19mmol）在氯仿（120mL）中分三份加入3-氯过氧苯甲酸酸（约77％纯度，5.20g，〜23mmol，2.5当量）和将混合物在0℃下搅拌1小时。 稀释所得混合物用CH 2 Cl 2（80mL）洗涤，用10％硫代硫酸钠水溶液洗涤（2×30mL）和盐水（2×20mL），用Na2SO4干燥，和蒸发。 将残余物在硅胶上用己烷/纯化。EtOAc（60/40），得到11c，为白色固体（2.30，收率78％）：
第4步：[4-氨基-2-[(1-甲磺酰基哌啶-4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮的制备
将11c（43.1mg，0.134mmol）和4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯（30.0mg，0.174mmol，1.3当量）在i-PrOH（4mL）中的悬浮液在100-110℃下在微波辐射下加热。 1小时浓缩所得混合物，并将残余物在硅胶上用CH2Cl2 / MeOH（95/5）纯化，得到26，为浅黄色固体（47.1mg）：[4-氨基-2-[(1-甲磺酰基哌啶-4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮：白色固体；熔点218-219℃。
主要参考资料
[1] Diab S, Eckhardt S, Tan A, et al. A phase I study of R547, a novel, selective inhibitor of cell cycle and transcriptional cyclin dependent kinases (CDKs)[J]. Journal of Clinical Oncology, 2007, 25(18_suppl): 3528-3528.
[2] Chu X J, DePinto W, Bartkovitz D, et al. Discovery of [4-amino-2-(1-methanesulfonylpiperidin-4-ylamino) pyrimidin-5-yl](2, 3-difluoro-6-methoxyphenyl) methanone (R547), a potent and selective cyclin-dependent kinase inhibitor with significant in vivo antitumor activity[J]. Journal of medicinal chemistry, 2006, 49(22): 6549-6560.