人ISTHMIN 1蛋白(ISM1)ELISA检测试剂盒主要用于检测Isthmin 1蛋白(ISM1)，经检测与其它相似物质无明显交叉反应。人ISTHMIN 1蛋白(ISM1)ELISA检测试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术，使用时实验结果颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比，通过绘制标准曲线计算出样本中ISM1的浓度。
图1 使用人ISTHMIN 1蛋白(ISM1)ELISA检测试剂盒分析的参考示意图
检测原理
ISM1(Isthmin 1)是一个蛋白质编码基因，在肿瘤发生和侵袭中很重要，包括在结直肠癌 (CRC)中，与ISM1相关的疾病包括阴道口睾丸血肿，该基因的一个重要类似物是THBS4。人ISTHMIN 1蛋白(ISM1)ELISA检测试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上，捕获样品及标准品中的待测物ISM1，清洗后再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗，形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物，随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育，待孵育结束后清洗，接着加入TMB显色后，若样本中有待测物则显蓝色，加入终止液停止反应。使用人ISTHMIN 1蛋白(ISM1)ELISA检测试剂盒的检测过程中游离的成分均被洗去，用酶标仪在450 nm处测OD值，颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比，通过绘制标准曲线计算出样本中ISM1的浓度。[1]
注意事项
使用人ISTHMIN 1蛋白(ISM1)ELISA检测试剂盒混合蛋白质溶液时，应始终避免起泡。为了避免交叉污染，在添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。此外，每种试剂应单独使用容器，确保试剂不间断地添加到板孔中，为了确保准确的结果，在孵育步骤中需要粘合好封板膜。当使用自动洗板机时，在加入洗涤缓冲液后加入30秒的浸泡期，或者在洗涤步骤之间将板旋转180度，可以提高测定精度。在进行人ISTHMIN 1蛋白(ISM1)ELISA检测试剂盒检测时，应该注意显色剂应保持无色直到添加到板中，确保显色剂不受光线照射，显色剂应从无色变为蓝色。
参考文献
[1] Alshawaf E, Marafie S K, Abu-Farha M, et al. Circulating Isthmin-1 Levels and Their Relationship with Diabetes and Metabolic Diseases in Kuwaiti Adults[J]. Biomedicines, 2025, 13: 101.