背景技术
杜鹃醇的化学名称为4-(4-羟苯基)-2-丁醇,纯品为白色粉末,易溶于水,溶于甲醇、乙醇和乙腈等有机溶剂。杜鹃醇主要存在于桦木、槭树科、杉木和郁金等药用植物中,主要作为生物催化法合成香料(如覆盆子酮和白桦苷)的原料;因结构与络氨酸酶活性抑制物质类似,大多具有酚式结构,杜鹃醇具有抑制黑色素合成的作用,因此还被用作化妆品美白成分。然而，正是由于具有抑制黑色素合成的作用,从而干扰了皮肤中络氨酸向黑色素的正常酶转化过程,添加了杜鹃醇美白成分的化妆品会造成皮肤美白过度而出现白斑等过敏症状,目前已有数千起“白斑”症状投诉。
由于杜鹃醇的副作用,2013年9月份,台湾地区发布公告,禁止在化妆品中使用杜鹃醇成分。虽然有厂商将杜鹃醇作为化妆品新原料向国家食药局提出过行政许可申请,但因未通过安全性审批,含有杜鹃醇的化妆品均未获批在我国上市销售。2013年11月份,国家食药总局在《关于调整化妆品许可备案管理有关事宜的通知》中着重加强了对美白类产品管理措施,将宣称有助于皮肤美白或能减轻皮肤表面色素沉着的化妆品，一并纳入祛斑类化妆品管理,自2015年1月1日起,上述产品必须取得特殊用化妆品批准证书后方可组织生产。
为了有效的监控含有杜鹃醇的美白类化妆品,采用有效手段检测化妆品中杜鹃醇的成分是关键。目前国内外文献中对杜鹃醇的报道主要集中于其在生物体内赋存状况和其生物合成方法等方面,未见有涉及到其检测技术研究方面的报道,化妆品中杜鹃醇检测还处于空白状态。
检测方法[1]
一、建立杜鹃醇标准曲线
将50mg杜鹃醇(纯度≥85%)溶于乙腈配制成浓度为1000ug/mL的标准储备液。分别移取标准储备溶液用含有体积百分比0.1%的甲酸-乙腈配制成浓度分别为15,50,100,250,500,1000mg/L共6个浓度的标准工作溶液,取各浓度标准工作液,经0.22um滤膜过滤，取10L进样按液相色谱条件进行测定,每个系列进样3次,取平均峰面积值。
液相色谱条件：高效液相色谱仪,配有荧光检测器(安捷伦1260,美国安捷伦公司);色谱柱:Phenomenex Kinetex C18,100×4.6mm(内径),2.6um(粒径);流动相:A:体积浓度为0.1%的甲酸水溶液;B:乙腈;洗脱方式:梯度洗脱:0~6 min,25%B,6~7min,90%B,7~9min,25%B;流速:1.0mL/min;荧光检测条件:激发波长:280nm,发射波长:315nm;柱温:30℃;进样量:10uL。
以色谱峰的峰面积为纵坐标，与其对应的杜鹃醇浓度为横坐标作图,绘制标准工作曲线,求得回归方程为y=0.2342x+1.1720。如附图所示,为荧光检测器所检测到的峰面积与杜鹃醇浓度的关系曲线,可见,在0.05~1000mg/L浓度范围内,杜鹃醇的浓度值与响应峰面积值之间的相关系数为0.9998，呈良好的线性关系。杜鹃醇的检出限为0.5mg/kg,能够满足化妆品成分测试的要求。
二、化妆品中杜鹃醇的检测
1、试样处理
称取待测样本0.20g(精确至0.001g),置于10mL塑料离心管中,加0.15mL 0.02mol/L的醋酸铵水溶液,涡旋30s,再加5%三氯乙酸-乙腈混合提取液(70:30,V/V)1.85mL,涡旋60s后超声提取15min,然后以10000rpm转速离心10min,取上清液通过0.22um微孔滤膜,得到提取物溶液,备用;上述待测样本分别为霜膏、乳液、水剂以及面膜。
2、试样测定
用自动进样器准确吸取10uL提取物溶液注入高效液相色谱仪,按色谱条件进行测定,记录色谱峰的保留时间和峰面积。杜鹃醇标准品色谱图参见附图所示,从图中可以看出杜鹃醇标准品在280nm下检测到的出峰时间是2.33min。在上述霜膏、乳液、水剂以及面膜化妆品中的出峰情况,结果显示,所有化妆品基质中均未检测到杜鹃醇。
参考文献
[1]苏州出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心. 一种检测化妆品中杜鹃醇的方法:CN201410053218.3[P]. 2014-05-14.