青风藤为防己科植物青藤和毛青藤的干燥藤茎，又名青藤、寻风藤、滇防己等，被收录至ChP 2020年版一部。青风藤味苦、辛，性平，是治疗风湿痹症、关节肿胀的传统中药，常用于风湿性和类风湿性关节炎的治疗。青风藤中含有丰富的生物碱，例如青藤碱(sinomenine)、四氢表小檗碱、双青藤碱、木兰花碱等，其中青藤碱是主要成分，含量达2%，具有显著的抗炎、镇痛、免疫抑制、抗肿瘤等作用。盐酸青藤碱的水溶性高于青藤碱，有利于药物吸收，因此主要以盐酸青藤碱的形式药用。
目前盐酸青藤碱的工业提取方法主要包括溶剂直接回流法、碱化回流法与酸水提取法三大类。酸水提取法是以盐酸为溶剂，通过浸渍或渗漉获得酸水提取液，后续步骤包括钙盐沉淀、调低pH值后氯仿萃取、再次调节pH值至酸性、浓缩结晶、重结晶、干燥。与回流法相比，酸水提取法无需加热、能耗更低、氯仿用量更小，盐酸青藤碱的提取率及纯度较高，成本适中，但工艺步骤较多，钙盐的使用也会产生大量固体废渣，有必要进一步优化该工艺过程。
针对酸水提取法目前存在的问题，本文设计了“萃取 -水洗 - 反萃取”的盐酸青藤碱提取和纯化新工艺，用于代替现有的钙盐沉淀过程。
提取方法[1]
1、青风藤酸水提取液的制备
称取青风藤药材800g，加入0.3mol/L盐酸8L浸提，使用电动搅拌器搅拌5h以上，过滤，得青风藤酸水提取液。
2、盐酸青藤碱的提取新工艺设计
本研究通过“萃取-水洗-反萃取”工艺代替目前已有的“钙盐沉淀- 萃取 -酸化”工艺。氯仿作为萃取用有机溶剂，在经过第4步反萃取、分相后便不再参与盐酸青藤碱的制备。如果氯仿可在生产过程中重复使用，便可减少生产成本，因此探究氯仿能否多次套用便显得尤为重要。反萃取后的氯仿若能够成功套用至下一次的提取过程，便可通过循环利用减少有机溶剂用量、降低生产成本。改进后的盐酸青藤碱精制新工艺具体流程图如图所示。
3、萃取和反萃取试验操作
量取青风藤酸水提取液60mL，加至1000mL蓝盖瓶中，用5 mol/L氢氧化钠溶液调节青风藤酸水提取液的pH值至9~10，得到碱性体系(E);照一定的体积比将氯仿加至E中，搅拌条件下萃取1h以上。将平衡后的萃取体系移至离心管中，离心(3577xg)10min后转移至分液漏斗中分相，下相为有机相(O)，弃去水相。将O相与纯净水照一定的体积比加至分液漏斗中，然后充分振荡、水洗，静置分相后弃去上层水相，得到有机相(O)。使用0.01mol/L盐酸对O相进行反萃取:将二者照一定的体积比混合，然后置磁力搅拌机上搅拌、萃取30min以上,转移至分液漏斗中静置分相，得到水相(A，即盐酸青藤碱反萃取液)及有机相(O3,即用于回收套用的氯仿)。
在萃取、分相的过程中，水相的颜色明显较氯仿相深，表明大部分色素留在水相中被弃去;洗涤过程中色素更多地留在氯仿层;但在反萃取过程中则是水相颜色略深。这可能是pH值变化带来的影响。结晶得到的盐酸青藤碱终产品为白色晶体。
分析方法
1、溶液配制
对照品溶液:称取青藤碱对照品9.85mg，置10mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，配制成质量浓度为985ug/mL的对照品溶液母液，充分混匀后，精密量取母液并适量加甲醇稀释，制成质量浓度分别为985、492.5、98.5ug/mL的对照品溶液;各浓度对照品溶液经0.22um有机相微孔滤膜滤过,取续滤液，即得。
供试品溶液:称取制备的盐酸青藤碱晶体8mg,置10mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，充分混匀后经0.22um有机相微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2、色谱条件
色谱柱Agilent ZORBAX SB-C18柱(4.6mmx250mm,5um):流动相甲醇、水和乙二胺(体积比50:50:0.25%)，等度洗脱:检测波长262nm;流速1.0mL/min;柱温25℃:进样量10uL。本色谱条件下，盐酸青藤碱的HPLC谱图如图所示[1]。
参考文献
[1]彭祖仁,任丹丹,颉佳乐,等. 盐酸青藤碱萃取和精制的新工艺[J]. 中国医药工业杂志,2024,55(10):1399-1405. DOI:10.16522/j.cnki.cjph.2024.10.012.