简介
UDP葡萄糖醛酸是一种重要的生物分子，通常呈现为白色晶体或粉末状。它具有特定的溶解性，一般在水中微溶，但在极性较强的有机溶剂中可能有一定的溶解度。UDP葡萄糖醛酸在生物体内扮演着关键角色，它参与多种生物化学反应。
UDP葡萄糖醛酸的性状
合成
方法一：将葡萄糖醛酸（63 mg）、ATP （1.5 eq.）和UTP （1.5 eq.）溶于水中，放入15ml离心管中，其中含有MES缓冲液（100 mM, pH 6.5）和MgCl2 （10 mM）。加入适量AtGlcAK （3mg）、腮红蛋白（4mg）、PmPpA （2.5 mg）至混合物中。加水使反应混合物的总积达到10ml。将溶液在恒温培养箱中37°C温和摇晃36小时。用对茴香醛糖染色薄层色谱（EtOH:H2O = 7:3）监测产物形成。用同样体积的冰镇乙醇使反应熄灭。4℃孵育30分钟后离心。收集上清，通过BioGel P-2凝胶过滤柱得到产物UDP葡萄糖醛酸[1]。
方法二：在20 mL反应体系中进行制备级合成UDP-GlcA，反应体系中含有50 mM pH 8.0 Tris-HCl缓冲液，20 mM GlcA, 22 mM ATP, 22 mM UTP， 20 mM MgCl2和0.1-2 mg不同的酶。使用0.6 mg AtGlcAK， 0.4 mg AtUSP和0.1 mg EcPpA合成UDP-GlcA。将反应混合物在37℃下轻摇孵育4-12小时。用薄层色谱法监测udp -糖的生成（异丙醇：NH4OH:H2O=7:3:2）。将90%的单糖转化为udp糖。煮沸5分钟使反应停止。将反应混合物离心以除去沉淀物。浓缩反应混合物进行分离。通过凝胶过滤（bio-gel P2, bio-rad）从反应混合物中分离udp -糖。把含有生成物的分数混合起来。冻干馏分得到UDP葡萄糖醛酸[2]。
用途
UDP葡萄糖醛酸在用于研究酶的催化活性和产物的生成。例如：UDP葡萄糖醛酸（0.27 mg, 0.29 μmol）与PmHS2（40 μg, 20 μg mL-1）在含有Tris （0.70 mg, 5.8 μmol）、MnCl2 （0.43 mg, 3.5 μmol）和UDP-GlcNTFA （0.21 mg, 0.35 μmol）的水缓冲液（2 mL, pH 7.2）中室温孵育过夜。通过LC-MS分析监测酶促反应的完成情况。反应溶液（2ml）经FSPE滤池（2g）以80% MeOH洗脱得到化合物[3]。
参考文献
[1] Improved one-pot multienzyme (OPME) systems for synthesizing UDP-uronic acids and glucuronides. By: Muthana, Musleh M.; et al. Chemical Communications (Cambridge, United Kingdom) (2015), 51(22), 4595-4598.
[2] Comparing substrate specificity of two UDP-sugar pyrophosphorylases and efficient one-pot enzymatic synthesis of UDP-GlcA and UDP-GalA. By: Guo, Yuxi; et al. Carbohydrate Research (2015), 411, 1-5.
[3] Fluorous-Assisted Chemoenzymic Synthesis of Heparan Sulfate Oligosaccharides. By: Cai, Chao; et al. Organic Letters (2014), 16(8), 2240-2243.