背景技术
S-腺苷蛋氨酸-L-甲硫氨酸(SAMe)是甲硫氨酸的一种有机四价硫形式(金属硫)的磺酰化合物,被称为“活性甲硫氨酸”,SAMe作为重要的中间代谢产物,广泛存在于各种生物体中,也是人体内一种重要的生理活性物质,SAMe稳定盐目前采用的主要是SAMe硫酸对甲苯磺酸双盐和SAMe1,4-丁二磺酸盐(S-腺苷蛋氨酸 1,4-丁二磺酸盐)。
目前有关S-腺苷蛋氨酸 1,4-丁二磺酸盐合成的文献及专利比较多,但其中绝大多数都是采用生物发酵的方法得到SAMe,然后用酸进行提取,最后再制备成所需的稳定盐。例如中国专利200610053835.9用乙酸乙酯水溶液从经过发酵培养的酿酒酵母细胞中抽提S-腺苷-L-甲硫氨酸,然后将其转化成S-腺苷蛋氨酸 1,4-丁二磺酸盐。该专利由于采用生物合成,均存在杂质数量及其种类不好控制,工艺比较繁琐，不利于产业化生产的问题。
制备方法[1]
一、甲基化试剂的制备
在装有磁力搅拌的500mL单口反应中,氨气保护下加入干燥的180mL二乙二醇二甲醚和55mL干燥的三氟化硼乙醚溶液,冰浴冷却至0℃,缓慢加入41mL干燥的环氧氯丙烷，一小时滴毕。滴加完毕后自然升温至5-10℃反应5小时,氮气氛围下过滤,滤饼用无水乙醚(50mLX2)洗涤。氮气吹干后得甲基化试剂61g,收率75%。低温(小于-10℃)保存。
二、S-腺苷蛋氨酸-L-甲硫氨酸的合成
在250mL三口瓶中加入三氟乙酸45ml,冷却至-10℃，氮气保护下将5g原料加入，分批加入甲基化试剂，一小时加毕,随冰盐浴自然升温至0℃反应，HPLC监测,反应完全后(原料残留小于1%),再次冷却至-5℃以下,慢慢滴加20mL水,用35ml异丙醚洗涤,得到水相。有机相再用水(5mLX2)萃取,合并水相后再用异丙醚(10mLX2)洗涤,得SAMe水溶液15mL。
三、S-腺苷蛋氨酸 1,4-丁二磺酸盐的制备
(1)弱酸性阳离子交换树脂的活化
取50mL D155弱酸性阳离子交换树脂装柱,先用去离子水洗至无气泡为止,然后再用200mL 1N盐酸慢慢洗涤，一小时洗毕。洗毕后用去离子水洗至大约中性(pH=6-7),然后再用200mL 1N氢氧化钠慢慢洗涤,一小时洗毕。洗毕后再用去离子水洗至pH小于7.5为止。最后再用200mL 1N盐酸慢慢洗涤,一小时洗毕,完毕后再用去离子水洗至pH大于6.5即可。
(2)S-腺苷蛋氨酸 1,4-丁二磺酸盐的制备
取SAMe反应液5mL,加入到上述活化好的树脂中,室温搅拌一小时,过滤,滤饼用去离子水洗至pH大于6.0。将滤饼取出置于反应瓶中,加入14mL 0.3N 1,4-丁二磺酸,室温搅拌一小时,过滤,滤饼用10mL水洗涤,滤液合并后在温度小于40℃下真空旋蒸至少量粘稠液体，加入,混合溶剂(甲醇:丙酮=1:1)6mL,室温搅拌半小时后氮气保护下过滤,干燥得S-腺苷蛋氨酸 1,4-丁二磺酸盐为白色粉末1.2g。
参考文献
[1]无锡好芳德药业有限公司. 一种新的制备S-腺苷蛋氨酸1,4-丁二磺酸盐的方法:CN201010296889.4[P]. 2011-03-16.