虎杖为蓼科植物虎杖Polygonum cuspidatumSieb.et Zucc.的干燥根茎和根,虎杖甙(polydatin,白黎芦醇葡萄糖甙)是从虎杖中提取的一种单体。虎杖甙的提取工艺近年来已有报道,尽管提取分离方法各异,在提取效率及产品纯度方面亦不同，但是这些方法的一个共同特点是:在整个工艺操作的某个阶段均在一定程度上使用了除乙醇之外的其他有机溶剂,如苯、氯仿、丙酮、甲醇等。有机溶剂不仅价格昂贵而且造成环境污染引起人体中毒,所以直接将上述提取分离虎杖甙的方法转化成工业化生产就难以实现,这必然造成虎杖甙的来源受到限制。
而采用化学方法全合成虎杖甙则步骤长、难度大、收率低、成本相当高,迄今为止这些方法仍然停留在实验室阶段,中试规模的虎杖甙全合成工艺尚未见报道。本文在前人研究基础上,着眼于虎杖甙提取分离的工业化生产要求,应用大孔树脂技术,以水和乙醇为溶媒,成功地将虎杖甙从虎杖中提取分离出来,产品纯度在98%以上。
提取工艺
取虎杖0.5kg粉碎成粗粉,加4倍量70%乙醇,加热回流1h,过滤,收集滤液。余渣再如上法提取两次,每次加2倍量70%乙醇。合并滤液，减压浓缩至约1L。放置过夜,过滤,滤液减压蒸馏回收乙醇,直至形成浸膏。以200 ml95%乙醇溶解浸膏，备用。
大孔吸附树脂分离工艺
1、大孔吸附树脂预处理：在提取器中加入95%乙醇反复浸泡大孔吸附树脂,直至上清液不出现浑浊为止。
2、大孔吸附树脂装柱：以乙醇湿法装柱(柱高1.5m,流速5m/h),继续用95%乙醇在柱上淋洗，不时检查流出的乙醇，至与水混合(1:5)不呈现白色浑浊为止。最后用大量去离子水洗去层析柱中的乙醇,备用。
3、吸附洗脱分离工艺：将200ml乙醇溶解液缓缓注入层析柱中,按4m/h的速度分别用去离子水、10%乙醇水溶液、20%乙醇水溶液淋洗层析柱。然后以30%乙醇水溶液约5~6倍大孔吸附树脂量冲洗层析柱,收集30%乙醇洗脱液。将该液浓缩至一定量,放置过夜即析出虎杖甙晶体,过滤烘干得黄色虎杖甙晶体粗品。
脱色精制流程
1、离子交换树脂预处理：在提取器中加入饱和食盐水反复浸泡脱色用离子交换树脂D900,直至饱和食盐水溶液接近无色为止。湿法装柱(柱高1m，流速5m/h),以适量去离子水在柱上淋洗,备用。
2、粗品虎杖甙的精制脱色工艺：将95%乙醇溶解粗品虎杖甙溶液缓缓注入层析柱中，充分吸附后，按4m/h的速度先以去离子水淋洗层析柱(8~10倍柱体积量),然后再用30%乙醇水溶液洗脱,收集该洗脱液,并浓缩至一定量。在冷藏室内放置过夜即析出虎杖甙晶体,过滤烘干可得虎杖甙晶体纯品1.856g[1]。
参考文献
[1]谢扬,刘瑞源,赵霈. 利用大孔树脂富集虎杖甙[J]. 中药材,2004,27(2):132-133. DOI:10.3321/j.issn:1001-4454.2004.02.029.