介绍
GDF9抗体，缓冲液中含有PBS和0.09% 叠氮化钠。保存条件为+4°C或-20°C，避免反复冻融。应用范围为IHC-Fr，IHC-P（1：25 - 1：100），表达检测范围为1：100 - 1：1000。
图一 GDF9抗体分析
免疫原
GDF9抗体从成熟人GDF9的C端区域附近，针对结核菌素偶联合成肽VPAKYSPLSVLTIEPDGSIAYKEYEDMIATKC进行培养。BLAST分析的百分比身份：人类、黑猩猩、大猩猩、猩猩、长臂猿、狒狒、猴子、银河、狨猴、鼩鼱、蝙蝠、狗、犰狳（100%）;雪貂、绵羊、山羊、熊猫、猫、牛、猪、负鼠（97%）;老鼠、老鼠、仓鼠、兔子、马、火鸡、斑胸草雀、鸡（94%）;大象（90%）;豚鼠，非洲爪蟾（81%）。
特异性
GDF9抗体识别GDF9（生长分化因子9）高度保守的EPDG序列中的表位，GDF9是一种同源二聚体生长因子，属于TGF-β超家族，与骨形态发生蛋白（BMPs）密切相关。GDF9由卵母细胞特异性表达，在卵巢卵泡生成、正常卵泡发育和生育中起着关键作用。GDF9通过结合骨形态发生蛋白II型受体（BMPRII）以及随后显见激活TGF-β-I型受体（即活性素受体样激酶-5，ALK-5）来传递信号。克隆mAb-GDF9-53识别GDF9具有高免疫亲和力，并已被证明能中和GDF9的生物活性。在功能性测定中使用前建议去除叠氮化钠。
应用
基于表位定位和生物测定，GDF9抗体mAb-GDF9-53与相关的转化生长因子（TGF）β超家族成员（包括BMP15，也称为GDF9B）具有极低的交叉反应性。Pep-SPOT表位定位显示mAb-GDF9-53识别短4-aa序列，该结合基序位于mGDF9的C端指尖。抗体在Western印迹中检测到重组GDF9，但未检测到BMP15，并在卵母细胞提取物和卵母细胞调理培养基中检测到GDF9蛋白。在小鼠壁颗粒细胞（MGC）生物测定中，mAb-GDF9-53完全消除了GDF9的有丝分裂效应，但对TGFbeta1或激活素A刺激的MGC增殖无影响。同一剂量下无关的IgG对GDF9活性没有影响。mAb-GDF9-53剂量依赖性（0-160 mug/ml）降低了卵母细胞的有丝分裂活性，但在最大剂量下仅降低了约45%。
仅5mug/ml GDF9抗体就能中和90%的重组mGDF9有丝分裂活性，但仅中和15%的卵母细胞活性。与mAb-GDF9-53不同，TGFβ蛋白特异性中和抗体不影响卵母细胞的有丝分裂能力，而是完全中和了TGFβ1诱导的DNA合成。直接证明内源性GDF9蛋白是重要的卵母细胞分泌有丝分裂原，但也表明GDF9仅占卵母细胞总生物活性的一部分[1]。
参考文献
[1]B R G ,J L R ,M C , et al.Immunoneutralization of growth differentiation factor 9 reveals it partially accounts for mouse oocyte mitogenic activity.[J].Biology of reproduction,2004,71(3):732-9.