介绍
寡肽-1（三肽‑1）(GHK)是一种内源性胶原三肽，存在于血浆等组织液中，可调节皮肤再生，增强表皮基底细胞的分化和增殖能力，可以促进伤口愈合和组织再生，增加胶原蛋白和粘多糖，刺激核心蛋白聚糖的合成，促进血管生长和神经生长，具有抗氧化和抗炎效应。
图一 寡肽-1
合成
现有合成的缺点
目前寡肽-1的合成方法主要是经典固相合成。固相合成即将保护氨基酸由C端向N端逐个延伸，通过缩合、脱保护、再缩合、切割树脂、离心、冻干和高效液相制备得到纯度高于 90％的GHK产品，该方法中需要的树脂市场价格过于昂贵，交换活度小，且其合成过程中所使用的缩合剂和碱都明显过量，导致GHK原料成本增加，并且不适用于工厂大规模生产。以甘氨酸、赖氨酸和组氨酸为原料，分别制得N‑Boc‑Gly‑OH、His(trt)和Lys(Boc)，然后依次合成N‑Boc‑Gly‑His(trt)–OH，再合成N‑Boc‑Gly‑His(trt)‑Lys(Boc)–OH，然后脱去保护得到GHK三肽，该方法整个过程操作简单，不过缺点是合成N‑Boc‑Gly‑His(trt)–OH的收率较低，仅仅只有36 .5％，纯度也较低，并且合成过程中需要用到树脂，还不太适合工厂大规模生产，此外，最后得到的是GHK三肽的三氟乙酸盐，不是GHK三肽产品，不符合实际需求，专利CN111732628A公开了一种GHK三肽的合成方法，该方法从N末端依次合成到C末端，His成本较高，且由Boc‑Gly‑OSu与Trt‑His‑OH合成Boc‑Gly‑His(Trt)‑OSu时容易消旋和难以反应完全，副反应增加。
新合成方法
为此孙鹏程[1]等人提出了一种寡肽‑1的全液相合成方法，具体有以下四个步骤：
（1）合成Fmoc‑His(Trt)‑Lys(Boc)‑OtBu .HCl
Fmoc‑His(Trt)‑OH(100mmol) ,H‑Lys(Boc)‑OtBu .HCl(110mmo) ,HOBt(110mmol)称量于1000ml圆底烧瓶中，加DMF50ml，THF400ml，溶解，冰水浴30min，加TEA（110mmol），DCC （110mmol），搅拌30min后撤去冰浴，3h后，TLC监测Fmoc‑His (Trt) ‑OH反应完全，反应完毕后，过滤除去固体，取滤液浓缩至少量，加0 .5M盐酸溶液1000ml，析出固体，过滤取固体，真空干燥即得，纯度96 .6%，收率103 .5%。
（2）合成H‑His(Trt)‑Lys(Boc)‑OtBu
将步骤（1）得到的化合物溶于500ml二乙胺，浓缩至少量，加石油醚析出，过滤取固体，真空干燥即得，纯度97 .2%，收率99 .2%。
（3）合成Fmoc‑Gly‑His(Trt)‑Lys(Boc)‑OtBu .HCl
称取步骤（2）得到的H‑His (Trt) ‑Lys (Boc) ‑OtBu (80mmol)及Fmoc‑Gly‑OH (88mmo) ,HOBt(88mmol)于1000ml圆底烧瓶中，加THF400ml，溶解，冰水浴30min，加DCC （88mmol），搅拌30min后撤去冰浴，3h后，TLC监测H‑His(Trt)‑Lys(Boc)‑OtBu反应完全，反应完毕后，过滤除去固体，取滤液，浓缩至少量，加0 .5M盐酸溶液1000ml，析出固体，过滤取固体，真空干燥即得，纯度89 .9%，收率90 .2%。
（4）合成H‑Gly‑His‑Lys‑OH
将步骤（3）得到的化合物溶于500ml裂解液（TFA：DCM：TIS=60：30：10），浓缩至少量，加异丙醚析出，过滤取固体，真空干燥即得寡肽-1，纯度98 .1%，收率86 .8%，HPLC分析图见图二。
图二 寡肽-1的HPLC分析图
参考文献
[1]湖南益安生物科技有限公司.一种寡肽-1的全液相合成方法:202411554313.1[P].2025-03-18.