LB培养基粉剂是一种预先配制好的干粉混合物,用于快速制备分子生物学中最常用的细菌培养基—LB培养基。 它为细菌生长提供了必要的营养和能量来源。LB是分子生物学最广泛使用的细菌培养基,可用于大肠杆菌、恶臭假单胞菌、副溶血性弧菌、芽孢杆菌等细菌的培养,配制简单,营养丰富,含有多肽、氨基酸、水溶性维生素和碳水化合物,可用于基因克隆、质粒DNA生产和重组蛋白生产等实验[1]。

核心组成成分
LB培养基粉剂的典型配方(每升)如下:胰蛋白胨 10克,酵母提取物 5克,氯化钠 10克或5克。胰蛋白胨提供氮源、氨基酸和多肽,酵母提取物提供维生素、氨基酸和碳水化合物等生长因子,氯化钠维持培养基渗透压。琼脂粉仅在配制固体培养基时加入,每升加15克,作用是使培养基凝固[1]。
主要类型与用途
根据是否添加琼脂,LB培养基粉剂主要分为LB液体培养基(LB Broth)和LB固体培养基(LB Agar)两类,LB液体培养基(LB Broth)不含琼脂。主要用于细菌的液体培养,如大量表达外源蛋白或提取质粒DNA。LB固体培养基(LB Agar)添加了琼脂。用于细菌的划线分离、纯化、保存菌种等。此外,还有在Lennox配方基础上进一步降低氯化钠含量的低盐LB培养基,常用于对盐敏感的细菌培养或筛选。
使用方法
LB Broth粉剂培养基:取LBBroth粉剂培养基一袋(12.5g),加双蒸水450ml溶解后,定容到0.5L,121℃-20min高压灭菌,灭菌后温度降到40度以下使用[1]。
LB Agar粉剂培养基:取一袋(20g),加双蒸水450ml,待Tryptone,NaCl,YeastExtract溶解后(Agar不溶解),定容到0.5L,121℃-20min高压灭菌,灭菌后温度降到55度以下使用,或放室温保存[1]。
储存与稳定性
粉剂应储存在阴凉、干燥、密封的环境中,室温保存即可。未开封的产品有效期通常为1-2年。一旦开封,需尽快使用,以防吸潮结块。配制好的液体培养基放在4℃冰箱中密封保存,通常可稳定存放约一个月。含抗生素的平板需要在4℃冰箱中密封保存,建议在2周内使用完毕,以保证抗生素的有效性。
关键注意事项
配制时需穿戴实验服和一次性手套,防止粉末飞扬吸入。必须使用高压蒸汽灭菌法,仅用煮沸无法杀灭所有细菌芽孢。使用后应立即盖紧瓶盖,防止干粉受潮变质-。整个操作过程需遵循无菌操作规范。注意抗生素添加时机,务必等培养基冷却至55℃左右再加入抗生素,否则高温会使其失效[2]。
参考文献
[1] 上海唯地生物技术有限公司. LB 培养基产品说明书[EB/OL]. 上海: 上海唯地生物技术有限公司, [2026-04-15]. http://www.weidibio.com/.
[2] 上海莼试生物技术有限公司. LB 琼脂(lennox)说明书[M]. 上海: 上海莼试生物技术有限公司, 2019.