简介
人宫颈癌细胞是一类起源于宫颈上皮组织的恶性肿瘤细胞，最常见的病理类型为宫颈鳞癌细胞，多由高危型人乳头瘤病毒（HPV）持续感染引发，伴随细胞增殖失控、凋亡抑制及侵袭转移能力异常增强等生物学特征。
人宫颈癌细胞的性状
提取方法
提取人宫颈癌细胞时，先取术中切除的标本置于无菌容器，用无菌解剖刀切成3-4mm小块，再用PBS缓冲液清洗组织碎片；随后将盛有组织碎片的容器置于冰上，去除残留上清液，按每100mg组织加入1ml 0.25%胰酶EDTA消化液进行处理；接着在4℃冰箱孵育8小时后，弃去组织碎片中的胰蛋白酶，再置于37℃细胞培养箱继续孵育含残留胰酶的组织碎片30min；之后向组织碎片中加入经37℃水浴后的完全培养基，用移液管轻轻分离组织碎片；最后用无菌不锈钢丝网（100-200nm）过滤，分散所有剩余组织，计数并接种细胞进行培养[1]。
PFKP基因沉默对人宫颈癌细胞生物学行为的影响
PFKP沉默对人宫颈癌细胞增殖的影响
为探究PFKP对人宫颈癌细胞增殖的影响，PFKP在MS751细胞中沉默后，采用MTS法检测细胞增殖情况。结果如图4.6显示，进行PFKP沉默的siRNA-PFKP1和siRNA-PFKP3两组的细胞活性在48h均显著低于siRNA-NC组（P<0.001；P<0.01），在72h时，siRNA-PFKP1组和siRNA-PFKP3组的细胞活性同样显著低于siRNA-NC组（P<0.0001；P<0.05）。提示PFKP的沉默可以显著抑制人宫颈癌细胞的增殖[1]。
PFKP沉默对人宫颈癌细胞迁移的影响
采用伤口愈合实验探究PFKP对MS751细胞迁移能力的影响。与siRNA-NC组的伤口愈合率（46%±6%）相比，siRNA-PFKP1组（28%±3%）和siRNA-PFKP3组（30%±4%）的伤口愈合率显著降低（P<0.05），提示PFKP沉默后的siRNA-PFKP1组和siRNA-PFKP3组的伤口愈合速度显著低于siRNA-NC组，表明PFKP沉默可以显著抑制细胞的迁移能力[]。
PFKP沉默对人宫颈癌细胞侵袭的影响
将PFKP沉默后的MS751细胞接种到Transwell上室，在CO₂培养箱中培养48h，通过观察穿过基质胶和小室滤膜的细胞数，探究PFKP沉默对MS751细胞侵袭的影响，siRNA-PFKP1组穿过滤膜的细胞数（140±31）和siRNA-PFKP3组穿过滤膜的细胞数（74±23）均显著低于siRNA-NC组（387±51）（P<0.01；P<0.001），提示PFKP沉默可以显著抑制人宫颈癌细胞的侵袭能力[1]。
参考文献
[1] 欧丽. SLC5A9在人宫颈癌细胞生物学行为中的作用研究[D]. 苏州大学, 2023. DOI:10.27351/d.cnki.gszhu.2023.003016.