介绍
车叶草苷(asperuloside，ASP)是一种环烯醚萜苷，主要从白花蛇舌草的草药中提取，具有抗肿瘤，抗氧化和抗炎的广泛药理作用。近年来研究表明ASP能够通过多种途径，对人乳腺癌、白血病和口腔癌等细胞具有毒性作用，进而发挥良好的抗癌活性，可作为潜在的抗癌化合物使用。
图一 车叶草苷
作用机制
MTT分析显示，车叶草苷对DU145细胞的活力具有明显的抑制作用，且具有浓度依赖性，其24 h 半数致死量为643.57 μg/mL(图1)。据此，后续实验选取160 µg/mL和640 μg/mL分别为 L-ASP和H-ASP组实验浓度。
图二 不同浓度车叶草苷对DU145细胞活力影响的MTT法分析
qRT-PCR检测显示：低浓度车叶草苷和高浓度ASP处理均能使DU145细胞中miR-589-5p表达水平显著升高，PGK1 mRNA表达水平显著降低；在低浓度ASP或高浓度ASP处理的同时转染anti-miR-589-5p，ASP升高miR-589-5p表达水平和降低PGK1 mRNA表达水平的作用明显减弱(图三)。
图三 车叶草苷和miR-589-5p抑制剂对DU145细胞中miR-589-5p和PGK1 mRNA表达影响的qRT-PCR检测
miR-589-5p抑制剂减弱车叶草苷对DU145细胞增殖的抑制
MTT分析和平板克隆法实验显示，低浓度车叶草苷和高浓度ASP处理均能显著降低DU145细胞的活力和克隆形成数；转染miR-589-5p抑制剂能明显减弱低浓度ASP或高浓度ASP处理所致的DU145细胞增殖抑制(图四)。
图四 车叶草苷和miR-589-5p抑制剂对DU145细胞增殖的影响
miR-589-5p抑制剂减弱车叶草苷对DU145细胞迁移和侵袭的抑制
划痕实验分析显示，与Control组相比，低含量车叶草苷组、高含量车叶草苷组DU145细胞的划痕愈合率降低；与H-ASP组或H-ASP+anti-NC组相比，H-ASP+anti-miR组DU145细胞的划痕愈合率升高(图5)。Transwell分析显示，与Control组相比，L-ASP组、H-ASP组DU145细胞的侵袭数降低；与H-ASP组或H-ASP+anti-NC组相比，H-ASP+anti-miR-589-5p组DU145细胞的侵袭数升高(图五)[1]。
图五 车叶草苷和miR-589-5p抑制剂对DU145细胞迁移的影响
参考文献
[1]张禄阳,赵涛.车叶草苷通过miR-589-5p抑制PGK1表达和前列腺癌细胞增殖迁移和侵袭[J].中国组织化学与细胞化学杂志,2025,34(04):358-366.DOI:10.16705/j.cnki.1004-1850.2025.04.008.