猪胆酸(HYOCHOLIC ACID,CAS: 547-75-1)为白色针状结晶,溶于甲醇、乙醇、碱液,不溶于石油醚、苯和水。熔点188℃~189℃,分子式C24H40O5,分子量为408.57,其外观如图1所示。
图1. 猪胆酸外观
提取方法
取新鲜猪胆汁1 L、NaOH 100 g加热回流24h,冷至室温,以浓H₂SO₄调pH至8,加NaHSO₃ 5g,室温搅拌15 min,加入乙醚500 ml,继用稀H₂SO₄调pH至5,搅拌30min,分出有机层,加硅藻土及活性炭各10 g,搅拌30 min,过滤,滤渣以乙醚洗涤,滤液与洗液合并后蒸除乙醚。浓缩物加甲醇300 ml,浓H₂SO₄ 4 ml,于室温搅拌24 h,加NaHCO₃固体(约26 g)中和至pH 7,滤除无机盐,减压浓缩。加苯(或甲苯)300 ml回流5 min,蒸去苯(或甲苯)约200 ml,于冰浴中析出猪胆酸甲酯的加成物(1)过滤,苯(或甲苯)洗涤。合并滤液及洗液,蒸除溶剂后,加醋酐80 ml,无水醋酸钠8 g,回流5 h,蒸去约30 ml 溶剂后,冷却过夜,滤出固体,以冷醋酐洗涤,洗液与滤液合并,减压浓缩至干。加甲苯蒸馏除净醋酐。继用石油醚溶解,室温搅拌3 h,滤出固体,滤饼用石油醚洗涤。真空干燥,以甲醇、苯各重结晶一次,得到猪胆酸甲酯的醋酸酯(2)2 g,mp 183~184℃。滤液减压浓缩,残余物加乙醇 30 ml 加热溶解,冷却过夜,滤出固体,以少量冷乙醇洗涤,真空干燥,乙醇重结晶二次,得 CDCA 甲酯二醋酸酯(3)15 g,mp 112~113℃。
将2,3分别用10% NaOH水解14 h,以H₂SO₄调pH至4.5,乙醚提取,以10% NaCl洗涤,蒸除溶剂至小体积,加等体积石油醚,冷却过夜,滤出固体,继用乙醚-石油醚(1:1)洗涤,真空干燥,得猪胆酸1.5g,mp 185~186℃。[1]
生物活性
广大生物化学家对猪胆酸进行了深入研究,研究表明其具有非常重要的生理功能,有望用于治疗或改善多种疾病。
抑制炎症
猪胆酸是清开灵注射的有效成分之一,与牛黄有相似的药效活性,具有镇静开窍、清热解毒之功,一些研究表明其在体外模拟血脑屏障中具有较高的透过能力,提示在治疗脑血管疾病中可能具有良好的前景。高永红等人[2]研究免疫细胞化学和分子生物学实验结果表明,体外模拟缺血 4 小时再灌注 12 小时损伤人鼠脑 MVEC 的 ICAM-1 蛋白和 mRNA 表达均明显增加,猪胆酸能显著降低 ICAM-1 表达,其抑制粘附分子产生的研究意义在于:一是避免由于白细胞粘附和微血栓形成的无复流,从而防止脑梗塞扩大,这实际上是对受损脑组织的“既病防变”的过程,是一种区域的整体治疗思想;二是在白细胞进入脑组织前提早干预,阻断其产生毒性物质的条件(与内皮细胞的粘附),改善细胞生存环境,抑制有直接破坏作用的自由基、水解酶等的产生,在缺血性损伤早期进行治疗。
改善体脂代谢
高脂饲粮可提供更多的能量并保留蛋白质,从 而降低养殖成本,但会对动物的脂质沉积和肝肠健康产生不利影响。据报道,长期摄入高脂饮食会诱发C57BL/6小鼠肥胖,并出现糖脂代谢紊乱甚至胰岛素抵抗,膳食脂肪通过调节肠道紧密连接分布和肠黏液的组成,刺激疏水性胆汁酸分泌并影响肠道菌群结构,进而影响肠道代谢与通透性。曹畅等人[3] 探究了外源添加猪胆酸(hyocholicacid,HCA)对高脂孕鼠体脂代谢、肠道微生物及胆汁酸代谢的影响,旨在研究HCA对改善小鼠体脂代谢紊乱的作用。研究表明,在高脂饲粮中添加 HCA 能增加分娩后小鼠肝 脏组织及皮下脂肪组织的重量,并改善高脂饮食诱导的分娩后和断奶后小鼠肝脏脂肪蓄积和肩胛棕色 脂肪量,增加分娩后小鼠血清中 TC、HDL 含量以 及断奶后小鼠血清中 TC、HDL、LDL 含量,提高肠 道有益菌群和优势菌群的相对丰度,改善小鼠肠道 内胆汁酸代谢,为今后 HCA 的实际生产应用提供了理论依据(图2)。

图2. 胆汁对体脂代谢的影响流程图
参考文献
[1] 丁新腾,范君瑶,葛羽,腾铸. 从猪胆汁提取鹅去氧胆酸及猪胆酸. 医药工业. 1987, 18(9):416.
[2] 高永红,哀拯忠,牛福玲,崔巍,朱陵群,王硕仁. 猪胆酸对体外缺血再灌注大鼠脑微血管内皮细胞ICAM-1的影响. 2025全国中医脑病学术研讨会.
[3] 曹畅,李玉莲,王洁,何情,龚艳梅,范志勇. 外源添加猪胆酸对高脂孕鼠体脂代谢、肠道微生物和胆汁酸代谢的影响. 中国畜牧兽医 2025,52(5):1999-2011.