顺-二十碳五烯酸乙酯全称：全顺式-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸乙酯，CAS：86227-47-6，无色至淡黄色油状液体，微有鱼腥味；不溶于水，易溶于乙醇、氯仿、己烷等有机溶剂；密度0.91g/cm³，多不饱和双键易氧化，需避光、充氮、2~-20℃密封冷藏保存，低温久置会析出絮状结晶。
制备方法[1]
1、制备碘内酯化物
将150g多不饱和脂肪酸混合液溶解在装有3L四氢呋喃的烧瓶内并持续搅拌，随后向混合液中添加130g碳酸氢钠以及碘化钠水溶液，其中碘化钠水溶液由70g碘化钠溶解在1300mL蒸馏水中配制而成。搅拌20分钟后，向烧瓶内继续添加420g单质碘，体系随后置于4℃下反应48小时，此时主要多不饱和脂肪酸EPA1，DHA2发生碘介导的内酯化反应，形成碘内酯3和碘内酯4。随后，称取960g碳酸氢钠和675g亚硫酸钠溶解在3L蒸馏水中，并将混合物缓慢倒入反应液中猝灭反应。得到的混合物以乙酸乙酯萃取，有机相减压蒸馏得到含有碘内酯3和碘内酯4的混合物。将混合物溶解在4L正己烷中，使用2L 0.5M碳酸钠甲醇‑水碱性混合溶液洗涤，甲醇‑水比例为1:1。分离后的正己烷以饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压蒸馏，得到的溶液通过表面平铺5cm高度的300目硅胶粉层的砂芯漏斗，滤液减压蒸馏后得到60.9g精制碘内酯3和碘内酯4；
2、提纯EPA
在氮气保护下，将上述60.9g精制碘内酯3和碘内酯4加入到750mL含有100g碘化钠的氯仿溶液中。随后加入27mL 2‑甲基‑2‑丁烯溶液及21.6mL三乙基硅烷，混合物在室温下搅拌2小时。由于结构差异，碘内酯4中的γ ‑内酯环比碘内酯3中的δ‑内酯环更稳定。因此，该过程可选择性断裂碘内酯3重新生成EPA，而碘内酯4不反应。反应结束后，称取21.6g亚硫酸钠和20.3g柠檬酸钠溶解于2000mL水溶液中，并将该溶液加入体系中终止反应。随后，混合物使用4:1正己烷‑二氯甲烷萃取，萃取液用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后浓缩。得到的浓缩液使用1500mL正己烷溶解，随后使用1000mL 0.5M碳酸钠甲醇‑水碱性混合溶液萃取，甲醇‑水比例为1:1。摒弃正己烷层，碱水溶液使用1:1正己烷‑乙醚洗涤。此时，碘内酯4溶解在正己烷‑乙醚混合液中被去除，EPA以皂的形式溶解在碱水溶液中。洗涤结束后，以200mL 4.5M盐酸酸化后得到水溶液，经2:1正己烷‑乙醚萃取，有机相用饱和食盐水洗涤以及无水硫酸钠干燥后减压浓缩得到27.7g纯EPA。
3、顺-二十碳五烯酸乙酯的制备
将上述27.7g的纯EPA加入到85mL无水乙醇中，在不断搅拌的条件下向溶液中缓慢滴加1.5mL浓硫酸，随后在70℃下反应4小时，结束后自然冷却至室温。随后，使用2M氢氧化钠溶液中和体系至pH＝7，随后使用蒸馏水洗涤有机相，经无水硫酸钠干燥后减压浓缩得到顺-二十碳五烯酸乙酯粗产品，随后进行分子蒸馏得到26.9g高纯度顺-二十碳五烯酸乙酯。
参考文献
[1] 浙江班维尔生物科技有限公司. 一种规模化鱼油EPA分离及乙酯化方法:CN202510382318.9[P]. 2025-07-04.