2-正戊基噻吩英文:2‑n‑Pentylthiophene,无色淡黄色透明油状液体;不溶于水,易溶于二氯甲烷、THF、甲苯、石油醚;常压沸点约215℃,减压可低温蒸馏提纯;对空气轻度敏感,长期光照易微黄。
制备方法
以无水无氧氮气保护、经钠丝干燥除水的乙醚为反应溶剂,先将预制的正丁基锂乙醚溶液置于冰水浴0℃下,滴加等摩尔无水乙醚稀释的噻吩并室温搅拌1小时完成噻吩2位锂化,得到2‑噻吩基锂;随后将体系降温至−15~−20℃,缓慢滴加等物质的量1‑溴戊烷乙醚稀释液,滴加完毕升温回流反应18h,反应结束冷却后倒入碎冰淬灭,分出乙醚有机相并对水相二次乙醚萃取,合并所有有机液水洗、硫酸镁干燥,脱除溶剂后减压分馏提纯得到2‑正戊基噻吩[1]。
应用研究[2]
采用分子生物学方法,构建基因重组的Olfr110(Olfr110的核苷酸序列和氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示)重组质粒,以HEK293细胞过表达Olfr110,用不同浓度梯度的化合物2-正戊基噻吩刺激,通过检测生物发光,来直接检测细胞内cAMP的动态变化。阴性对照为转染空载PcDNA3.1质粒。将2‑正戊基噻吩用PBS配制成工作浓度为10‑2M、10‑3M、10‑4M、10‑5M、10‑6M、10‑7M、10‑8M,在过表达Olfr110和glosensor的HEK293细胞中,给予不同浓度(10‑2‑10‑8M)的化合物预孵育,用多功能酶标仪检测发光值,对结果进行统计分析作图,结果见图1。

图1表明,2-正戊基噻吩可以激活嗅觉受体olfr110下游Gs信号通路,引起细胞内cAMP的升高。以HEK293细胞过表达Olfr110/olfr109/olfr1420/olfr31和glosensor。以此来证明2‑正戊基噻吩特异性激活olfr110。将2‑正戊基噻吩用PBS配制成工作浓度为10‑2M、10‑3M、10‑4M、10‑5M、10‑6M、10‑7M、10‑8M,将含有2‑正戊基噻吩的待测样品刺激过表达不同嗅觉受体的HEK293细胞,利用Gloensor(TM)‑cAMP检测生物发光,结果见图2。结果实验结果表明,化合物2‑正戊基噻吩可以能够特异性激活嗅觉受体olfr110。

参考文献
[1] Ramanathan, V.; Levine, R. The Alkylation and Arylation of 2-Thienyllithium and the Reactions of 3-Methylthiophene with Organometallic Compounds1. J. Org. Chem. 1962, 27, 1667–1670, https://doi.org/10.1021/jo01052a044.
[2] 山东大学. 2-戊基噻吩作为嗅觉受体olfr110的配体的应用:CN202211239661.0[P]. 2024-10-25.