小肠结肠炎耶尔森氏菌（Yersinia enterocolitica）是少数几种能在冷藏温度下（0~4℃）生长繁殖的肠道致病菌之一，是20世纪80年代以来引起国际社会广泛关注的重要食源性病原菌[1]。该菌致病后临床表现以急性胃肠炎为主，还可引起结节性红斑、败血症、关节炎等肠道外感染，甚至可诱发自身免疫性疾病[2]。鉴于该菌的危害性，许多国家已将其列为食品常规检测项目。在检测流程中，CIN-1培养基基础作为核心选择性分离培养基，承担着从复杂样品基质中高效分离目标菌的关键任务。
CIN-1培养基基础的组成与选择性原理
CIN-1培养基基础的名称来源于其三种核心选择性抑制剂的首字母缩写：头孢磺啶（Cefsulodin）、三氯生（Irgasan）和新生霉素（Novobiocin）[2]。CIN平板的成分即为Cefsulodin、Irgasan、Novobiocin，其中Cefsulodin和Novobiocin及胆盐可有效抑制革兰阳性菌，Irgasan可同时抑制革兰阳性菌和某些革兰阴性菌，从而使小肠结肠炎耶尔森氏菌得以充分生长。CIN-1培养基基础中还含有甘露醇和中性红指示剂构成的鉴别系统，目标菌发酵甘露醇产酸后菌落呈深红色，与周围培养基形成鲜明对比。在比较实验中发现，CIN-1培养基基础平板上的菌落呈现特征性的"公牛眼"状，干扰菌虽与其颜色相似，但缺乏菌落表面覆盖的透明层，这一形态特征使得目标菌的辨识具有较高的可靠性[3]。
CIN-1培养基基础在食品污染监测中的应用
在食品安全检测领域，CIN-1培养基基础被广泛应用于生肉、乳制品及水产品的致病菌筛查。在南京地区市售生肉污染状况调查中，采集了农贸市场散装生鲜猪、牛、羊肉、鲜鱼及冷藏冷冻禽肉共95份样本，将样本接种于改良磷酸盐缓冲液中4℃增菌7~21天，每隔一周取样作碱处理后接种在CIN平板上，25℃培养24小时后挑取桃红色带深色核心、周围有狭窄晕圈的牛眼状菌落进行初筛。最终从95份生肉中分离出小肠结肠炎耶尔森氏菌14株，检出率达14.7%，其中生牛肉的污染率高达40%（6/15）[1]。在CIN培养基上显示出耶尔森氏菌属特征的菌落中，绝大多数为小肠结肠炎耶尔森氏菌，少部分为中间耶尔森、克氏耶尔森、弗氏耶尔森，偶尔分离到气单胞菌，这充分说明了CIN-1培养基基础在食品样品检测中的高特异性和实用价值。
CIN-1培养基基础在临床检测中的方法学评价
在临床粪便样本检测中，CIN-1培养基基础同样展现出卓越的分离效能。实验中建立了改良培养方法（YSE-CIN），将粪便混液加入改良耶尔森菌选择性增菌液（YSE）中于16℃培养2天，再接种于CIN平板上25℃培养24小时。研究结果显示，YSE-CIN法从200份腹泻粪便中检出18份阳性样本（检出率9%），而3种传统方法（PBSS-SS法、PAE-NYE法、PAE-DYS法）的阳性例数仅为3、5、8例，经McNemer检验差异具有统计学意义[2]。实验还发现，使用CIN-1培养基基础时，YSE-CIN法的背景菌落仅1~2种，比其他3种方法大为减少，显著降低了肉眼分辨难度，小肠结肠炎耶尔森氏菌在CIN平板上表现为直径1~2mm、具有深红色中心、绕有透明无色圆环且边缘清晰的菌落，与背景菌落形态区别明显。这一研究表明，CIN-1培养基基础与优化增菌策略相结合，可大幅提高临床检测的灵敏度和效率。
CIN-1培养基基础与其他选择性培养基的比较
在能力验证实验中，系统比较了CIN-1琼脂、CIN琼脂（进口）、改良Y琼脂、含吐温80的麦康凯琼脂和含吐温80的BS琼脂五种选择性培养基的分离效果。研究发现，在各培养基中，CIN的选择性最强，但同时抑制性也最强，碱处理后仅25℃培养物经涂抹接种才能生长零星的特征性菌落，实际应用中容易造成漏检[3]。相比之下，CIN-1培养基基础的选择性较好且未出现漏检，鉴别性也较好，菌落特征明显[3]。所以建议将CIN-1琼脂和改良Y琼脂同时用于分离以获得最佳效果，并指出国产的CIN-1效果好于进口的CIN，不会出现漏检。此外，小肠结肠炎耶尔森氏菌最常见的致病性血清型3/O:3在CIN琼脂上可能受到抑制，因此建议在实际检测中结合其他分离方法互补使用，以确保CIN-1培养基基础在检测体系中发挥最大效能[3]。
参考文献
[1] 丁洁, 许文炯, 王炜, 等. 市售生肉中小肠结肠炎耶尔森氏菌污染状况分析[J]. 中国卫生检验杂志, 2006, 16(10): 1235-1236.
[2] 郑浩轩, 孙勇, 姜泊. 4种小肠结肠炎耶尔森菌培养方法的研究与评价[J]. 南方医科大学学报, 2007, 27(9): 1438-1440.
[3] 张昕, 张惠媛, 汪琦, 等. 小肠结肠炎耶尔森氏菌的检测[J]. 检验检疫科学, 2008, 18(6): 23-26.