菝葜，又名金刚藤，为百合科植物菝葜Smilax china L.的干燥根茎，其主要成分是皂苷，且是以菝葜皂苷元（sarsasaｐogenin, SAR）为主要苷元
所衍生的皂苷。 研究表明，菝葜皂苷元具有抗衰老、抗炎、降血糖等作用。近年来研究报道，菝葜皂苷元还可用于抗
肿瘤，如肝癌、胃癌等。
活性研究
吴源陶等人探讨了菝葜皂苷元（sarsasapogenin，SAR）对人结直肠癌细胞HT-29增殖、凋亡和自噬的影响。方法将HT-29细胞分为对照组（DMEM培养液）和SAR组（DMEM培养液+DMSO+10、20、30、40、50、60mg/L SAR溶液）；分别采用MTT法、流式细胞术、TUNEL染色及MDC染色检测细胞的增殖、凋亡及自噬的变化情况；用Western blot法检测细胞中Caspase-3、Caspase-9、Beclin-1及LC3B蛋白表达水平。结果，经菝葜皂苷元处理后，HT-29细胞的增殖能力明显降低（P<0.05），凋亡和自噬水平明显增加（P<0.05）；与对照组相比，SAR组细胞Caspase-3、Caspase-9、Beclin-1及LC3B蛋白表达水平显著上调（P<0.05）。 结论，菝葜皂苷元能够抑制结直肠癌细胞增殖，诱导细胞凋亡和细胞自噬的发生，其机制可能与上调Caspase-3、Caspase-9、Beclin-1及LC3B蛋白表达水平有关[1]。
廖子君等人为观察不同浓度菝葜皂苷元对体外培养胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡的影响。方法:BGC-823细胞经不同浓度菝葜皂苷元处理后,采用MTT法检测细胞的生长活性,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:随菝葜皂苷元浓度的增加,胃癌BGC-823细胞增殖抑制率、凋亡率亦升高。结论:菝葜皂苷元对胃癌BCC-823细胞的增殖有抑制作用,并可诱导细胞凋亡[2]。
提取方法
1、芦笋粉末制备
将新鲜芦笋洗净、烘干,利用粉碎机将其磨成细粉,过60目筛,备用。
2、总皂苷提取
称取芦笋粉末,用30％的乙醇溶液,超声提取45min,减压过滤重复提取一次,合并滤液，加入溶液体积一半的石油醚脱脂,得到下层脱脂醇水溶液，减压蒸馏,除去乙醇溶剂，然后,加入溶液体积一半的正丁醇萃取,得到上层含芦笋皂苷的液体;同上,重复3次,将萃取液合并,进行减压蒸馏,直至正丁醇蒸发完毕,最终得到浓缩液。
3、大孔吸附树脂分离
将提取得到的浓缩液上样到已经预处理过的D101大孔树脂柱子上,然后分别以2个BV体积的蒸馏水、10％的NaOH溶液、30％的乙醇水溶液和90％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，将收集得到的90％乙醇水溶液洗脱液减压蒸馏,得到浓缩液。
4、水解和纯化
向浓缩液中加入10％的盐酸溶液,于50℃水浴中酸解8h，减压抽滤,得黄褐色的滤渣——菝葜皂苷元粗品。将滤渣用甲醇溶解,然后加入活性炭粉末脱色、抽滤,得到浅黄色滤液，将得到的滤液在60℃下调节到饱和状态,然后置于室温下冷却结晶,得到浅黄色针状晶体。按上述结晶方法重结晶2次,最后得到得到菝葜皂苷元纯品为白色针状晶体[3]。
5、菝葜皂苷元纯度测定
采用高效液相色谱仪进行纯度测定。色谱条件:色谱柱为反相C18柱,检测器为示差检测器,流动相为甲醇∶水,比例为95∶5,流速为1mL/min,柱温为30℃,进样量为20μL。
参考文献
[1] 吴源陶,邹译娴,张春虎,等. 菝葜皂苷元对结直肠癌细胞HT-29凋亡和自噬的影响[J]. 湖南中医药大学学报,2021,41(11):1645-1649. DOI:10.3969/j.issn.1674-070X.2021.11.001.
[2] 廖子君,张晓明,郭亚焕,等. 菝葜皂苷元对胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡影响的实验研究[J]. 现代肿瘤医学,2010,18(6):1085-1087. DOI:10.3969/j.issn.1672-4992.2010.06.13.
[3] 王晓芳,黄嬛,李明娟,等. 芦笋菝葜皂苷元的分离纯化及其抗肿瘤活性研究[J]. 嘉兴学院学报,2017,29(6):109-114. DOI:10.3969/i.issn.1671-3079.2017.06.018.