N-Boc-N'-Fmoc-L-赖氨酸为正交双保护L-赖氨酸单体，Boc对碱稳定、Fmoc对酸稳定，可独立分步脱除两个氨基保护基，是固相多肽合成专用构筑单元，多用于侧链定点修饰多肽、多肽药物、PDC药物连接子构建。
有机反应
取反应物N-Boc-N'-Fmoc-L-赖氨酸(0.925 8g，1.9759mmol)、24-90(1.8g,1.9759mmol)、HBUT(1.1240g,2.9639mmol)、HOBT(0.4005g,2.9639mmol)放入100mL反应瓶中，加入少量DMF溶解，置于-5℃，搅拌0.5小时，缓慢滴加DIEA(1.4752mL，8.8911mmol)，2小时后将反应移至常温下反应。反应结束，加去离子水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)萃取，分离有机相，水相用乙酸乙酯萃取3次(50mL×3) ，合并有机相，用饱和氯化钠清洗2次(50mL×2) ，加无水硫酸钠干燥。抽滤，液体浓缩至10mL，加入石油醚(70mL)超声10分钟，静置30分钟，析出固体，抽滤，滤饼用石油醚(50mL×3)清洗3次，真空干燥得产品3.7g，产率100％[1]。
在二氯甲烷(20毫升)中，将N-Boc-N'-Fmoc-L-赖氨酸(3.6毫摩尔，1.0当量)和羟基苯并三唑(HOBT)(0.72克，5.3毫摩尔，1.5当量)的溶液中，向搅拌的混合物中加入溶解在甲醇(10毫升)中的2‑氨基乙基三苯基溴化鏻(1.38克，3.6毫摩尔，1.0当量)和三乙胺(TEA)(1.24毫升，8.9毫摩尔，2.5当量)的溶液。之后，将1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)(1.02克，5.3毫摩尔，2.5当量)溶解在二氯甲烷(10毫升)中，并在冰浴下逐滴加入，然后将混合物在室温下搅拌过夜。使用薄层色谱(TLC)监测反应，然后蒸发溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱进一步纯化(二氯甲烷：甲醇＝10:1，并滴加三乙胺)，真空干燥，得到产物为白色泡沫(1.83克，产率80％)。接着将底物溶解在二氯甲烷(2毫升)中。在搅拌下加入三氟乙酸(TFA)(0.5毫升)，并在室温下搅拌2小时。反应混合物与二氯甲烷多次共蒸发。得到的化合物3‑1在真空下干燥，定量收率，无需进一步纯化直接用于后续步骤[2]。
参考文献
[1] 重庆阿普格雷生物科技有限公司. 一种聚乙二醇偶联药物、其制备方法及应用:CN201911192038.2[P]. 2021-05-28.
[2] 北京大学. 亚细胞靶向递药偶联物及其制备方法、组合物和用途:CN202411691605.X[P]. 2026-05-26.