Fmoc-3-(4-吡啶基)-L-丙氨酸别名：Fmoc-β-(4-Pyridyl)-L-Ala-OH；Fmoc-4-Pal-OH，白色至类白色固体粉末；多肽固相合成常用非天然氨基酸砌块，属于Fmoc保护型非天然氨基酸，侧链为4-吡啶甲基，是苯丙氨酸类似物，吡啶环替代苯环。
有机应用
采用标准Fmoc固相多肽合成法，在全自动微波多肽合成仪上制备该三肽。向砂芯注射器中加入0.25mmol 商品化2-氯三苯甲基氯树脂（取代度0.53mmol/g，472mg）。加入8mL二氯甲烷溶胀树脂15min。随后，将Fmoc-3-(4-吡啶基)-L-丙氨酸（Fmoc-4-Pal-OH，194.2mg，0.5mmol）溶于含N,N-二异丙基乙胺（174.2μL，1.0mmol）的8mL二氯甲烷溶液中，加入树脂体系，搅拌反应20h。抽除砂芯注射器内液体，树脂用10mL混合溶液（92.5%二氯甲烷、5.0%甲醇、2.5%N,N-二异丙基乙胺）洗涤2次。后续Fmoc保护氨基酸残基采用标准DIC/N,N-二异丙基乙胺/Oxyma缩合体系进行偶联；偶联反应在50℃下反应10min，重复偶联一次保证反应完全。多肽序列组装完成后，使用20%哌啶的DMF溶液于60℃处理3min，脱除Fmoc保护基。向树脂中加入8mL三氟乙酸-二氯甲烷等体积混合液孵育3h，将多肽从树脂上切割下来。反应结束后放出砂芯注射器中的液体，收集液减压浓缩。浓缩得到的干燥残渣溶于 3mL水-乙腈等体积混合液（含体积分数0.05%三氟乙酸），经冷冻干燥得到中间体11，共45.9mg，产率65.6%[1]。
向树脂13（560mg）的DMF（2.5mL）悬浮液中，加入溶于无水DMF（4.2mL）的对应Fmoc保护氨基酸（含Fmoc-3-(4-吡啶基)-L-丙氨酸，0.3mol/L）、PyBOP（0.3mol/L）与 HOBt（0.3mol/L）混合溶液。该悬浮液搅拌3min，随后加入 DIPEA（0.6mol/L）。在氩气保护、室温条件下搅拌悬浮液3h。树脂依次用二氯甲烷（150mL）、甲醇（120mL）、二氯甲烷（75mL）洗涤，真空干燥过夜，得到分别负载相应Fmoc保护氨基酸的树脂14。向树脂 14（161mg，0.13mmol）中加入哌啶（体积分数20%）的二氯甲烷溶液（2.1mL），室温搅拌1h。过滤后，树脂依次用二氯甲烷（50mL）、甲醇（45mL）、二氯甲烷（25mL）洗涤，真空干燥得到树脂15。取多份树脂 15（每份65mg）置于全自动合成仪反应模块（40孔规格，Advanced ChemTech）的12mL反应孔中。向每一孔内加入无水DMF（2mL）配制的对应羧酸（0.3mol/L）、PyBOP（0.3mol/L）、6‑Cl‑HOBt（0.3mol/L）及DIPEA（0.6mol/L）混合溶液。氩气保护下，悬浮液以300rpm涡旋振荡反应5h。随后对反应孔过滤，除去树脂16上的反应液，树脂依次用四氢呋喃、二氯甲烷、甲醇、二氯甲烷洗涤[2]。
参考文献
[1]Sahin U, Dong Z, Widdison W, Macdonald J, Sun X. Linkers for Antibody Drug Conjugates. WO/2026/162789, published 06.08.2026, PCT/EP2026/052556, filed 30.01.2026.
[2]TALBOT A, MALTAIS R, KENMOGNE L C, et al. Solid-phase synthesis of libraries of ethynylated aminosteroid derivatives as potential antileukemic agents[J]. Steroids, 2016, 107: 55-64.