技术背景
ALC-0315（AbMole，M22500）是用于构建脂质纳米颗粒（LNP）的可电离阳离子脂质，化学名为(4-羟丁基）氮杂二基双（己烷-6,1－二基）双（2-己基癸酸酯），分子量766.3。LNP是RNA递送领域中最有应用潜力的载体之一，其中可电离脂质是构成LNP最为关键的四个组分之一（四个组分一般为可电离脂质、磷脂、胆固醇、PEG－脂质），并且可电离脂质是最为关键的功能核心，直接决定了RNA的包封效率、细胞摄取与内体逃逸能力。ALC-0315（AbMole，M22500）作为经过大规模验证的可电离脂质分子，为 RNA递送体系的构建提供了高效的组分。其pH依赖型的电离机制、生物可降解性与固有免疫活性的多重属性，使ALC-0315成为核酸递送、基因表达调控与疫苗载体基础研究中的明星试剂。
ALC-0315的制备方法
关于ALC-0315的制备方法已有报道，但较为复杂。马克斯·普朗克科学促进学会研究人员采用2‑己基癸酸开始在四步连续流方法中进行脂质ALC‑0315的合成工作[1]。具体实验合成步骤较为繁琐，其简要合成方法为：首先，在流反应器中使用亚硫酰氯在2‑甲基四氢呋喃中将2‑己基癸酸转化成2‑己基癸酰氯，在23至80℃范围内的温度加热(1)。通过加入0.01摩尔当量的N,N‑二甲基甲酰胺，观察到向酰氯的更快转化。在不加入碱的情况下，使用过量的1,6‑己二醇在升高的温度进行2‑己基癸酰氯的酯化(2)。在第三步(3)中，使用次氯酸钠水溶液、溴化钾碱性水溶液和2,2,6,6‑四甲基哌啶基氧基(TEMPO)在2‑甲基四氢呋喃中的溶液，通过两相反应来氧化单酯2‑己基癸酸6‑羟基己基酯。使用在线液‑液分离器纯化产物(3)。在最后的合成步骤中，将醛流与4‑氨基‑1‑丁醇和硼氢化物的甲醇溶液组合，从而产生(4-羟丁基）氮杂二基双（己烷-6,1－二基）双（2-己基癸酸酯），即ALC-0315。
参考文献
[1] 马克斯·普朗克科学促进学会. 用于生产阳离子脂质的连续流方法. CN117813281A[P]; 2024.04.02.