DHPS抗体是针对脱氧羟腐胺缩合酶（deoxyhypusine synthase, DHPS）的特异性科研试剂，在检测DHPS蛋白表达、定位及其介导的hypusination修饰水平中发挥核心作用。DHPS是催化真核翻译起始因子5A（eIF5A）前体赖氨酸残基发生hypusine修饰的限速酶，该修饰对eIF5A的活性影响非常重要[1]。DHPS在多种肿瘤及代谢性疾病中本被检测发现，DHPS抗体在这些研究中，广泛应用于组织芯片免疫组化、Western blot、免疫荧光及免疫共沉淀等一系列实验。
DHPS抗体在黑色素瘤研究中的应用
郭静思的论文中，研究了DHPS介导METTL3自身甲基化修饰调控黑色素瘤发展的机制，并评价了靶向DHPS的变构抑制剂GL-1[1]。在该研究中，DHPS抗体应用于多个关键实验环节。首先，研究者利用商品化人体黑色素瘤组织芯片（111例皮肤黑色素瘤和18例正常皮肤细胞），通过免疫组化染色检测DHPS及其介导的Hypusination表达水平，发现黑色素瘤细胞中DHPS和Hypusination蛋白表达水平明显高于癌旁正常细胞[1]。其次，在细胞水平上，Western blot实验使用DHPS抗体验证了shRNA敲低DHPS的效率，并检测了DHPS对METTL3、YTHDF2、YTHDC1蛋白表达的调控作用[1]。在机制探索中，Co-IP实验使用DHPS抗体检测DHPS与METTL3蛋白的结合情况，结果证实DHPS不能直接与METTL3结合，而eIF5A-Hypusine能与METTL3结合[1]。此外，在抑制剂GL-1的评价中，DARTS和CETSA实验结合Western blot分析，利用DHPS抗体检测了GL-1与DHPS的稳定结合能力，结果表明GL-1可保护DHPS不被蛋白酶水解并维持其热稳定性[1]。免疫组化实验进一步显示，GL-1可抑制肿瘤组织中Ki67、METTL3、YTHDF2、YTHDC1及hypusination的表达，同时促进cleaved-caspase3表达[1]。
DHPS抗体在胃癌转移研究中的应用
研究探讨了DHPS在胃癌中的表达及其临床意义，并探究其在胃癌转移中的可能作用机制[2]。该研究使用含92例胃癌组织及其相应癌旁组织的组织芯片，使用DHPS抗体以免疫组化染色检测DHPS表达[2]。结果发现，62例（67.4%）胃癌组织DHPS高表达，且其表达强度与肿瘤直径、TNM分期、浸润深度密切相关，与患者性别、年龄、淋巴结转移和远处转移无明显相关性[2]。在体外实验中，研究者利用DHPS-siRNA和DHPS抑制剂GC7分别干预人胃癌细胞株MGC803，通过细胞侵袭实验检测细胞侵袭力变化，并以ELISA法检测转移相关蛋白VEGF、MMP2、MMP9的表达[2]。结果显示，DHPS-siRNA和GC7均可显著下调MGC803细胞的侵袭力，且DHPS-siRNA还可下调VEGF、MMP2和MMP9蛋白表达（P<0.05），而GC7对这些蛋白表达的影响不明显[2]。该研究中，DHPS参与胃癌细胞侵袭和转移的调控，其机制可能一方面通过影响ERK通路，另一方面通过调节eIF5A活性发挥作用[2]。DHPS抗体支撑了组织水平DHPS表达与临床病理特征关联的建立，为后续功能实验提供了依据。
DHPS抗体在非酒精性脂肪性肝病研究中的应用
该研究使用DHPS抗体，采用免疫组化、Western印迹和实时PCR观察脂肪肝造模小鼠及正常饮食小鼠DHPS的表达情况，免疫组化工作浓度为1:100，Western blot工作浓度为1:500[3]。结果显示，脂肪肝模型小鼠较对照组DHPS表达量明显升高，以肝脏和脂肪组织为主[3]。在NAFLD患者肝穿标本中，免疫组化结果显示NAFLD患者较健康人群DHPS表达增多，且DHPS阳性肝细胞数与肝细胞脂肪变性程度呈正相关[3]。此外，人肝细胞系HL-7702脂肪造模后，免疫荧光实验使用DHPS抗体观察到DHPS在肝细胞核内高表达[3]。该研究还通过腺病毒过表达DHPS小鼠模型发现，DHPS过表达可加重高脂饮食小鼠肝脏脂肪变性，其机制可能与胰岛素抵抗（Irs1）、脂肪酸合成增加（Ascbg2）及炎性因子（iNos、IL-6）相关[3]。
参考文献
[1] 郭静思. DHPS介导METTL3自身甲基化修饰调控黑色素瘤发展的机制及靶向抑制剂评价[D]. 沈阳: 中国医科大学, 2024.
[2] 苏文雨, 王吉林, 熊华, 等. DHPS在胃癌转移中的作用及其机制研究[J]. 胃肠病学, 2018, 23(2): 70-74.
[3] 苗琪, 卞兆连, 王昭月, 等. eIF5A活化因子DHPS在非酒精性脂肪性肝病中的表达及意义[J]. 肝脏, 2016, 21(4): 253-258.