小鼠神经小胶质细胞试剂盒的应用

2020/10/18 17:56:53

背景[1-6]

小鼠神经小胶质细胞试剂盒适合于培养和分离小鼠的神经小胶质细胞。小鼠神经小胶质细胞培养试剂盒包含:(1)OptiTDSTM小鼠神经小胶质细胞组织解离液(2)小鼠神经小胶质细胞组织处理缓冲液(3)FibrOutTM小鼠神经小胶质细胞成纤维抑剂。

神经是神经纤维构成的组织,把脑和脊髓的兴奋传给各个器官或把各个器官的兴奋传给脑和脊髓。其中,鼠神经小胶质细胞是神经胶质形成的主要功能细胞。神经胶质出现在大脑发育早期向成熟阶段转化的过程中,当程序性细胞死亡时,或在大脑发育的过程中,中枢神经系统受损或受到病理损坏时,神经胶质可做为大脑的巨噬细胞。胶质细胞能在II类组织相容性复合体表达CD-4阳性T细胞时表达抗原,能进行Fc介导的巨噬作用,并且与造血细胞和巨噬细胞组织共享抗原。

利用试剂盒中提供的神经组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的神经组织能使得神经组织中小胶质细胞的一些功能特性发生改变,从而将小胶质细胞分离开来。神经是神经纤维构成的组织本试剂盒适用于分离培养小鼠神经小胶质细胞。体系提供了组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以程度地降低所培养的小胶质原代细胞中成纤维细胞的含量。

应用[7][8]

小鼠神经小胶质细胞试剂盒可用于小胶质细胞在EAE小鼠模型中的保护作用研究:

利用EAE小鼠模型探讨小胶质细胞的神经保护作用。

方法:

1.本研究用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫C57BL/6小鼠诱导EAE模型,按照随机分组的原则将72只小鼠分为正常对照组、EAE模型组、Tuftsin干预组三组;免疫后第1天用微量注射泵在EAE小鼠皮下缓慢注射500μM Tuftsin对小鼠进行干预治疗,正常对照组与EAE模型组用微量注射泵皮下注射生理盐水。从免疫后第1天开始采用国际公认的神经功能评分标准对各组小鼠进行神经功能评分。

2.分别在免疫后第7天、14天、21天及28天处死各组小鼠并取其脑和脊髓组织,行组织病理学LFB染色及MBP免疫组织化学染色,观察并比较各组实验小鼠组织病理学改变的差异;通过RT-PCR方法检测TNF-α、TGF-β、IL-10的含量;Western blot方法测定iba-1蛋白的含量。

结论:1.Tuftsin干预组小鼠发病率低,起病时间延长,神经功能损害严重程度轻,且恢复较快。2.Tuftsin干预组小鼠脊髓组织的髓鞘脱失程度轻。3.Tuftsin干预组小鼠脑组织中的促炎因子水平低,抗炎因子水平高。4.Tufusin能够促进小胶质细胞的激活及吞噬活性。5.小胶质细胞在Tuftsin的刺激基础上激活,能够从促炎性表型M1转化为抗炎性表型M2,从而发挥抗炎性作用,在EAE中发挥保护作用。

参考文献

[1]Alternatively activated microglia and macrophages in the central nervous system[J].Rafael Franco,Diana Fernández-Suárez.Progress in Neurobiology.2015

[2]Macrophage activation and its role in repair and pathology after spinal cord injury[J].John C.Gensel,Bei Zhang.Brain Research.2015

[3]In acute experimental autoimmune encephalomyelitis,infiltrating macrophages are immune activated,whereas microglia remain immune suppressed[J].I.D.Vainchtein,J.Vinet,N.Brouwer,S.Brendecke,G.Biagini,K.Biber,H.W.G.M.Boddeke,B.J.L.Eggen.Glia.2014(10)

[4]The role of microglia in human disease:therapeutic tool or target?[J].Nathalie Cartier,Coral-Ann Lewis,Regan Zhang,Fabio M.V.Rossi.Acta Neuropathologica.2014(3)

[5]Macrophages and CNS remyelination[J].Veronique E.Miron,Robin J.M.Franklin.J.Neurochem..2014(2)

[6]Mechanisms of remyelination:recent insight from experimental models[J].Tatsuhide Tanaka,Shigetaka Yoshida.Biomolecular Concepts.2014(4)

[7]Experimental autoimmune encephalomyelitis is a good model of multiple sclerosis if used wisely[J].David Baker,Sandra Amor.Multiple Sclerosis and Related Disorders.2014

[8]贾娜.小胶质细胞在EAE小鼠模型中的保护作用研究[D].天津医科大学,2016.

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