胸腺素F5

本品系小牛、猪胸腺提取得到的一类重要激素。国外主要用胸腺素组分5, 含有多种多肽，相对分子质量为1000-15000。我国用的猪胸腺素组分5是等电点为3.5-9.5的不同蛋白质组成的混合物，相对分子质量在15000以下。
胸腺素组分5具有免疫活性，具体含有胸腺素α₁、胸腺素α₅、胸腺素α₇、胸腺素β₃和胸腺素β₄等活性成分，主要作用是促进T细胞分化成熟，诱导前T细胞(淋巴干细胞)转化为T细胞，并进而分化成为具有各种特殊功能的T细胞亚群，增加和调整机体的免疫功能。胸腺素对热稳定，短时间内加热至80℃，生物活性不降低。免疫增强剂。治疗胸腺发育不全综合征、运动失调性毛细血管扩张症等免疫缺陷性疾病。国内用于治疗复发性口疮、麻风重症感染等伴有免疫功能低下的患者。
不良反应：少数人服用后出现荨麻疹、皮疹等局部过敏反应，偶见头昏发热等全身过敏反应。注射前应做皮试。方法一、从猪胸腺提取
提取、去杂蛋白 将猪胸腺(新鲜或冰冻)绞碎，提取两次。每次加入2倍量酸性生理盐水，调pH约3，10℃以下提取4h, 纱布过滤。合并两次滤液，调pH7左右，水浴80℃保持10min, 冷至10℃以下过滤或离心， 得提取液。加入冷丙酮约5倍量，静置4h, 收集沉淀， 用丙酮、乙醚脱水， 得淡黄色丙酮粉。猪胸腺[酸性生理盐水]→[pH3, 4h×2, 10℃]滤液→[pH7; 80℃]提取液[冷丙酮]→[4h]丙酮粉
丙酮沉淀、去杂蛋白、盐析 将丙酮粉加入pH7、0.01mol/L CPB去杂蛋白。第一次加入CPB 6倍量体积， 搅拌0.5h, 离心，残渣再加入4倍体积的CPB操作一次。 合并两次清液， 加硫酸铵达25%饱和度， 调pH7, 静置数小时，离心去沉淀。上清液调pH4.6, 加硫酸铵达50%饱和，搅拌0.5h, 冰箱中静置数小时，离心收集沉淀。
丙酮粉[CPB]→[pH7]清液[(NH4)2SO425%饱和度]→[pH7]上清液[(NH4)SO4 50%饱和度]→[pH4.6]盐析物
透析去盐、层析分离 将盐析物中加入5倍量蒸馏水，调pH为7。先将冷蒸馏水透析至无硫酸根离子， 再对pH7、0.01mol/L CPB透析10h， 透析液离心得上清液。用EDTA-离子交换纤维素柱在pH6-7交换，用pH4、0.02mol/L CPB洗脱， 加冷丙酮沉淀，3号垂熔漏斗过滤，得丙酮粉。

去热原、无菌灌封 将丙酮粉溶于无热原蒸馏水， 用1mol/L盐酸调pH6, 加等量乙醚剧烈搅拌1h, 1500r/min离心15min，吸出中层清液，清液以等量乙醚同法洗两次，合并清液加入5倍量丙酮，析出沉淀，得丙酮干粉。测定热原，配制含胸腺素2.5 mg/ml, pH6-7.5, 无菌灌装得淡黄色胸腺素注射液。
丙酮粉[蒸馏水，乙醚]→[pH6]无热原粉[无菌灌装]→[pH6-7.5]胸腺素注射液
方法二、从小牛胸腺中提取
提取、过滤 将小牛胸腺绞碎后，加0.5%正辛醇-0.9%氯化钠溶液约3倍量(V/V)进行匀浆，然后1500r/min 离心30min, 上清液用纱布过滤得滤液。
小牛胸腺[0.5%正辛醇-0.9%NaCl]→[离心]上清液[纱布过滤]→滤液
去杂蛋白 将滤液加热至80℃ 15min, 冷却后1500r/min离心30min, 除杂蛋白，得上清液。然后加(NH4)2SO4达25%饱和度时，纸浆抽滤，得滤液。
上清液[80℃, 15min]→[离心]上清液[(NH4)2SO4]→[纸浆抽滤]滤液
盐析、层析分离 滤液用20%的醋酸调pH值4.0, 加(NH4)2SO4达50%饱和度， 1500×g离心30min， 得沉淀。用-15℃丙酮洗涤至白色粉末，真空抽干丙酮。粉末溶于0.1mol/L、pH8.4Tris-盐酸溶液中，4000×g 离心30min, 得上清液。
滤液[醋酸，(NH4)2SO4]→[pH4.0 离心]沉淀[0.1 mol/L Tris-盐酸]→[pH8.4]上清液
脱盐 上清液过Sephadex G-150柱脱盐，以pH8.4磷酸盐缓冲液(0.02 mol/L)洗脱，再过Sephadex G-25柱脱盐，用蒸馏水洗脱，收集活性峰，冷冻干燥即得胸腺素。
上清液[Sephadex G-150柱]→洗脱液[Sephadex G-25柱]→胸腺素。