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异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷

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产品介绍:中文名称:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)
英文名称:Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside
纯度:98.0-101.0% 包装信息:100g;500g;1KG;10KG;25KG
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英文名称:Isopropyl-^b-D-thiogalactoside, dioxane-free, 99%
CAS:367-93-1
包装信息:1g 备注:B21149
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产品介绍:中文名称:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
英文名称:IPTG
CAS:367-93-1
纯度:≥98.0% 包装信息:100G,500G,1KG 备注:生化级
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产品介绍:中文名称:异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷
英文名称:Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside
CAS:367-93-1
纯度:>=98.0% 包装信息:5G,10G,100G,500G,1KG 备注:超纯,99%,有害品 1克/45
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产品介绍:中文名称:异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷
英文名称:IPTG
CAS:367-93-1
备注:试剂级
异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷新闻专题
IPTG
异丙基硫代半乳糖苷(IPTG, CAS:367-93-1),能够广泛应用于生化科研及诊断产品开发领域。Lac启动子是使用最早、研究最详细的启动子之一,所以目前用于诱导重组蛋白表达的诱导剂主要是IPTG和乳糖。在重组蛋白的诱导表达过程中,诱导剂对于外源基因高效、稳定的表达起着非常重要的作用。
2017/9/22 16:41:27
异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷 IPTG生产厂家及价格列表
IPTG_湖北艺康源化工有限公司
2017/11/20 17:01:19
异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷 IPTG_湖北鸿鑫瑞宇精细化工有限公司
价格:¥4500/吨
2017/11/20 09:17:43
异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷
概述 诱导原理 IPTG的优点 实验材料的准备 实验方案 MSDS 用途与合成方法 异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷价格(试剂级) 上下游产品信息 新闻专题
中文名称:异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷
中文同义词:异丙基-Β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG);异丙基-Β-D-硫代半乳糖苷(异丙基-Β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷);IPTG 异丙基-Β-D-硫代半乳糖苷;甲基-BETA-D-半乳糖苷;异丙基-Β-D-硫代半乳糖苷/异丙基-Β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷/1-甲基乙基-Β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷;异丙基-B-D-硫代半乳糖苷 1G;ISOPROPYL 尾-D-THIOGALACTOPYRANOSIDE;异丙基 Β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷 IPTG
英文名称:Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside
英文同义词:POLYETYLENE GLYCOL 6000 MOL. BIOLOGY GRA;SULPHURIC ACID 0,01 MOL/L 0,02 N;YPD BROTH E;Isopropyl 2,3-O-isopropylidene-4-O-benzoyl-β-L-thiorhamnopyranoside;IPTG (Isopropyl-β-D-thiogalatopyranoside);Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside, <5ppm dioxane;Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside, <5ppm dioxane, plant origin (ex peach gum);Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside, 98.0%+, <5ppm dioxane
CAS号:367-93-1
分子式:C9H18O5S
分子量:238.3
EINECS号:206-703-0
相关类别:定制合成产品;微生物;Imidazolines/Imidazolidines ,Imidazoles ,Heterocyclic Acids;糖类化合物/单糖;食品添加剂;碳水化合物类;碳水化合物;糖类(碳水化合物);Intermediates中间体;检测,显色,标记试剂;Substrates;13C & 2H Sugars;Biochemistry;Galactose;Glycosides;Sugars;Thioglycosides;Enzyme substrates;Carbohydrates & Derivatives;Carbohydrates;原料药;单糖;检测标志试剂;生化试剂;酶底物;糖类化合物;医药中间体;substrate;其他生化试剂;生物化工;化学原药;糖类;医药原料;原料;生物化学;蛋白质组学;基因组学和分子诊断
Mol文件:367-93-1.mol
异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷
异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 性质
熔点 105 °C
比旋光度 -31 º (c=1, water)
储存条件 −20°C
形态Crystalline Powder
颜色White
水溶解性 soluble
Merck 5082
BRN 4631
稳定性Stable. Incompatible with strong oxidizing agents.
InChIKeyBPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N
CAS 数据库367-93-1(CAS DataBase Reference)
EPA化学物质信息.beta.-D-Galactopyranoside, 1-methylethyl 1-thio-(367-93-1)
异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 用途与合成方法
概述异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。IPTG 常用于需要诱导 β-半乳糖苷酶活性的克隆实验。它常与 X-Gal 或 Bluo-Gal 结合使用,用于重组细菌菌落的蓝白筛选,这些菌落可以诱导 lac 操纵子在大肠杆菌中的表达。IPTG 与 lacI 阻遏蛋白结合并改变其构象而发挥作用,防止 β-半乳糖苷酶编码基因 lacZ 的抑制。
诱导原理E.coli的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节 基因I。I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状态。在启动序列P上游还有一个分解(代谢)物基因激 活蛋白(CAP)结合位点。由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成lac操纵子的调控区,三个酶的编码基因即由同一调控区调节,实现基因产物的协调表达 。
在没有乳糖存在时,lac操纵子(元)处于阻遏状态。此时,I序列在PI启动序列操纵下表达的Lac阻遏蛋白与O序列结合,阻碍RNA聚合酶与P序列结 合,抑制转录起动。当有乳糖存在时,lac操纵子(元)即可被诱导。在这个操纵子(元)体系中,真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖进入细胞,经β-半乳糖苷酶催化,转变为异乳糖。后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白,使蛋白构象变化,导致阻遏蛋白与O序列解离、发生转录。异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的作用与异乳糖相同,是一 种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。
IPTG的优点1.能诱导酶的合成,但又不被分解的分子,称为安慰诱导物。由于乳糖虽可诱导酶的合成,但又随之分解,产生很多复杂的动力学问题,因此人们常用安慰诱导物来进行各种实验。
2.IPTG不被菌体代谢,为乳糖类似物,一旦进入细胞就会产生持续长久的诱导效果,所以IPTG的诱导效率高,往往只需要很少量(1mmol/L)即可达到理想诱导效果。由于IPTG不被代谢,在胞内专一诱导外源蛋白的表达。不受细胞代谢的影响,诱导效果持续稳定。乳糖有双效作用,既能做为诱导剂异乳糖的前体物质,又可以做碳源,在诱导过程中,很不稳定,IPTG因其优异的稳定性决定了它适合做实验研究用。
3.IPTG能在缺乏lacY基因下而有效地被抄送。
4.半乳糖苷键中用硫代替了氧,失去了水解活性,但硫代半乳糖苷和同源的氧代化合物与酶位点的亲和力相同,IPTG虽不为β–半乳糖苷酶所识别,但它是lac基因簇十分有效的诱导物。
使用方法:首先把IPTG配制成23.83 mg/ml(100 mM)的水溶液,并进行过滤除菌后保存。然后在100 ml的琼脂培养基中,加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal(20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。当dna片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ缺失细胞中后,涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培养基,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体)。
实验材料的准备1、诱导表达材料:
( 1 ) LB (Luria—Bertani))培养基:
酵母膏 (Yeast extract) 5g 蛋白胨 (Peptone) 10g
NaCl 10g 琼脂 (Agar) 1-2%
蒸馏水 (Distilled water) 1000ml pH 7.0
适用范围:大肠杆菌
( 2 ) IPTG 贮备液:
2 g IPTG溶于10 mL 蒸馏水中,0 . 22 μm 滤膜过滤除菌,分装成1 mL /份,-20 ℃ 保存.
( 3 ) l× 凝胶电泳加样缓冲液:
50 mmol / L Tris -CI ( pH 6 . 8 )
50 mmol / L DTT
2 % SDS (电泳级)
0.1 % 溴酚蓝
10 % 甘油
2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白纯化材料:
1 )酶溶法
(1)裂解缓冲液:
50 mmol / L Tris-CI ( pH 8 . 0 )
1 mmol / L EDTA
100 mmol / LNaCI
(2)50 mmol / L 苯甲基磺酰氟(PMSF ).
(3)10 mg / mL 溶菌酶.
(4)脱氧胆酸.
(5)1 mg / mL DNase I.
2 )超声破碎法
( 1 ) TE 缓冲液.
( 2 ) 2×SDS -PAGE 凝胶电泳加样缓冲液:
100 mmol / L Tris-HCI ( pH 8 . 0 )
100 mmol / L DTT
4 %SDS
0.2 % 溴酚蓝
20 % 甘油
实验方案1、外源基因的诱导表达:
(1)用适当的限制性内切核酸酶消化载体DNA 和目的基因.
( 2 )按连接步骤连接目的基因和载体,并转化到相应的宿主菌.
( 3 )筛选出含重组子的转化菌落,提取质粒DNA 作限制性内切核酸酶图谱,DNA 序列测定,
确定无误后进行下一步.
( 4 )如果表达载体的原核启动子为PL 启动子,则在30 -32 ℃ 培养数小时,使培养液的OD600达0.4-0.6 ,迅速使温度升至42 ℃ 继续培养3 -5h ;如果表达载体的原核启动子为tac 等,则37 ℃培养细菌数小时达到对数生长期后加IPTG 至终浓度为1 mmol / L.继续培养3 -5h .
( 5 )取上述培养液1 mL , 1000g 离心,1 min ,沉淀,加100 μL 聚丙烯酰胺凝胶电泳上样缓冲液后,作SDS -PAGE 检测.
2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白质纯化:
细菌的裂解
常用方法有:① 高温珠磨法;② 高压匀浆;③ 超声破碎法;④ 酶溶法;⑤ 化学渗透等.前三种方法属机械破碎法,并且方法① 、② 已在工业生产中得到应用,后三种方法在实验室研究中应用较为广泛.下面介绍酶溶法和超声破碎法的实验步骤.
酶溶法.常用的溶解酶有溶菌酶;β-1,3 -葡聚糖酶;β-1,6 -葡聚糖酶;蛋白酶;壳多糖酶;糖昔酶等.溶菌酶主要对细菌类有作用,而其他几种酶对酵母作用显著.主要步骤为:
4 ℃ ,5000rpm 离心,15 min ,收集诱导表达的细菌培养液(100 mL ).弃上清,约每克湿菌加3 mL 裂解缓冲液,悬浮沉淀.
用途 常用分子生物学试剂,常用于蓝白斑筛选及IPTG诱导的细菌内的蛋白表达等
用途 是β-半乳糖苷酶和β-半乳糖透酶的诱导剂,不被β-半乳糖苷水解,是硫代半乳糖转酰酶的底物
用途 IPTG 常用于需要诱导 β-半乳糖苷酶活性的克隆实验。它常与 X-Gal 或 Bluo-Gal 结合使用,用于重组细菌菌落的蓝白筛选,这些菌落可以诱导 lac 操纵子在大肠杆菌中的表达。IPTG 与 lacI 阻遏蛋白结合并改变其构象而发挥作用,防止 β-半乳糖苷酶编码基因 lacZ 的抑制。
安全信息
危险品标志 Xn,Xi
危险类别码 19-40-66-36/37/38
安全说明 23-24/25-36/37-22-36/37/39-27-26
WGK Germany 3
10
TSCA Yes
海关编码 29389090
MSDS信息
提供商语言
IPTG 英文
SigmaAldrich 英文
ACROS 英文
ALFA 中文
ALFA 英文
异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 价格(试剂级)
更新日期产品编号产品名称CAS编号包装价格
2017/06/06I0328异丙基1-硫代-β-D-半乳糖吡喃糖苷
Isopropyl 1-Thio-beta-D-galactopyranoside
367-93-11G375元
2017/06/06I0328异丙基1-硫代-β-D-半乳糖吡喃糖苷
Isopropyl 1-Thio-beta-D-galactopyranoside
367-93-15G990元
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