CYANINE3.5-马来酰亚胺

中文名称	CYANINE3.5-马来酰亚胺
中文同义词	CYANINE3.5-马来酰亚胺
英文名称	Cyanine3.5 maleimide
英文同义词	Cyanine3.5 maleimide
CAS号
分子式
分子量	0
EINECS号
相关类别	化学试剂
Mol文件	Mol File
结构式

CYANINE3.5-马来酰亚胺性质

溶解度	可溶于氯仿，甲醇，乙腈，DMF等有机溶剂，难溶于水
形态	powder
外观	Dark purple solid
激发峰(Ex)/发射峰(Em)	591/604 nm (PBS buffer)
ε(消光系数)	116000 L⋅mol−1⋅cm−1
Φ(量子产率)	0.35

CYANINE3.5-马来酰亚胺用途与合成方法

荧光标记染料

Cy3.5 (Cyanine 3.5) 是一种发红色荧光的花青素类荧光染料。Cy3.5在显影时可以用561nm或者594nm的激光束激发然后用 Texas Red® 相似的滤片观察，它是一种非常常用的标记染料。Cy3.5可以用来标记蛋白，抗体，多肽，核酸分子，纳米粒等。
马来酰亚胺(maleimide)是生物标记反应中常用的基团，它可以和巯基(-SH)通过亲和加成反应生成稳定的巯醚(thioester)结构从而实现标记。尽管胺基(比如赖氨酸精氨酸侧链)也有亲和性，但在中性或微酸性缓冲液中，马来酰亚胺选择性标记巯基(反应速度比胺基快>1000倍)。标记反应反应迅速，选择性高，产率好，另外，巯基是一种在生物分子中广泛存在的官能团，比如蛋白中的半胱氨酸(cysteine)和双硫键等，因此马来酰亚胺/巯基(maleimide/thiol)标记已成为仅次于NHS/胺基标记的最常用生物连接反应(bioconjugation)。
Cy3.5-马来酰亚胺的水溶性较低，所以在水相的标记反应体系内需要使用有机共溶剂，常用有机溶剂包括DMF，DMSO和乙腈等。如需标记的分子对有机溶剂敏感，可选择磺化花青素（sulfonated cyanine），即磺化Cy3.5-马来酰亚胺()。两者的光谱性质几乎一致，因此大部分应用可相互替换。两者的主要区别在于：磺化染料是水溶性的，在水相的标记反应体系内不需要使用有机共溶剂，并且降低染料在水中聚集的可能性，增强标记效率。
Cy3.5-马来酰亚胺标记后的产物Ex/Em是591nm/604nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Texas Red®，Alexa Fluor 594, BODIPY® TR, DyLight 594等。

注意事项

Cy3.5-马来酰亚胺水溶性较低，标记反应可在有机溶剂中进行或者含有机助溶剂的水相中进行。
天然生物分子中巯基一般于氧化状态(如双硫键)存在，在马来酰亚胺标记前，务必用还原剂(如DTT，TCEP)活化巯基并除去多余还原剂。
马来酰亚胺也可以和叠氮化合物反应，应避免叠氮官能团。
标记反应不要放在强光下，因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。

化学性质

外观 : 深紫色固体
ex/em : 591/604 nm (PBS缓冲液)
消光系数(ε) : 116000 L⋅mol−1⋅cm−1
量子产率(Φ) : 0.35

CYANINE3.5-马来酰亚胺