三糖铁琼脂

三糖铁琼脂是常用的分离纯化及鉴别培养基，其有效期约1~2周，常因水分蒸发干裂而失效。基层医院做细菌培养标本量少，如果准备过多，因失效变质，造成浪费；若准备量少，则称量误差大，成本较高。生化质控品冰冻保存有效期远远大于4℃或常温保存的期限。

(1)上层：a将蛋白胨、氯化钠、琼脂按比例加入蒸馏水中，热熔，调PH7.2；b加入乳糖、葡萄糖、硫酸亚铁、硫代硫酸钠、酚红，压力蒸汽灭菌113℃15分钟；c再加入尿素、玫瑰红酸
(2)下层：a将蛋白胨、氯化钠、琼脂按比例加入蒸馏水热熔，调PH7.6；b加入甘露醇、中国蓝，分装试管、高压113℃15分钟，冷却后加高压过的上层。注明：先将称量用具和分液烧瓶高压灭菌。中国蓝为指示剂，其水溶液应隔水煮沸无菌后使用。玫瑰红酸是乙醇溶液，无需灭菌，但加时应避开火焰，以免燃烧。